Injeção ortotópica na almofada de gordura mamária: estabelecendo câncer de mama em camundongos

Primeiro, estabeleça a linhagem celular de câncer de mama desejada em cultura. No dia anterior à operação, raspe o abdômen do camundongo e use creme depilatório para remover o pelo e expor os mamilos inguinais. No dia da operação, colete as células, anestesie o camundongo e confirme a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé. Usando uma pinça, aperte a pele ao redor do mamilo para criar um túnel elevado.

Em seguida, com a seringa de células coletadas, perfure a pele. A agulha deve seguir o túnel até que a ponta se aproxime do mamilo. Mova suavemente a ponta da agulha para dentro da almofada de gordura mamária, logo abaixo do mamilo. Remova a pinça para formar uma tenda de pele com a agulha e, em seguida, injete lentamente as células.

Por fim, retraia a seringa, tomando cuidado para não perturbar a protuberância redonda ao redor do mamilo. As células injetadas e os tumores subsequentes expressam luciferase e podem ser rastreados usando imagens bioluminescentes. No protocolo de exemplo, mostraremos o estabelecimento do câncer de mama ortotópico murino. No dia anterior à operação, prenda manualmente o camundongo receptor e vire o lado da barriga do animal para cima até o pelo a ser r