0 visualizações • 2:20 min. • April 30th, 2023
- Para começar, transfira 10 embriões de peixe-zebra, com a ajuda de uma pipeta de transferência, para um copo cheio de 20 mililitros de água. Agora, cultive os embriões a 28 graus Celsius, sob o ciclo claro escuro apropriado necessário para um experimento. Em seguida, transfira as larvas para placas de poço. Certifique-se de que cada poço contenha uma larva para dar espaço suficiente para nadar.
Agora encha completamente cada poço com água. Coloque a placa de poço na câmara de registro comportamental e rastreie o movimento larval usando um software de rastreamento de vídeo. As larvas exibem aumento do movimento no escuro e diminuição do movimento na luz quando expostas a um ciclo anormal de luz e escuridão devido ao aumento dos níveis de estresse. Calcular a diferença entre a distância média percorrida durante o último minuto de um período inicial e o primeiro minuto do período seguinte nos diz a resposta fotomotora do peixe.
Neste protocolo, examinaremos a resposta fotomotora em larvas de peixe-zebra e peixinho gordo expostas à cafeína. Primeiro, coloque a placa do poço contendo os peixes experimentais na câmara de registro comportamental. Em seguida, abra o protocolo de rastreamento desenvolvido anteriormente. No visualizador de rastreamento de vídeo, certifique-se de que todas as larvas estejam visíveis, que apenas uma larva esteja presente em cada poço e que os poços estejam alinhados com as áreas de observação definidas.
Em seguida, clique em Experimentar e Executar. Especifique o nome e o local de salvamento dos dados e clique no ícone Várias imagens ao vivo para destacar todas as áreas de visualização predefinidas. Por fim, feche o painel da câmara de gravação e clique em Plano de fundo seguido de Iniciar no monitor do computador.