Ensaio de captura de presas: um método para estudar o comportamento de captura de presas de larvas de peixe-zebra

- Para começar, coloque uma larva de peixe-zebra em uma câmara de gravação, como um poço com fundo de vidro, no qual uma larva pode nadar. Colete os paramécios, a presa, com a ajuda de uma micropipeta e coloque-os na câmara de gravação. Em seguida, coloque uma pequena gota de água no centro da lamínula e coloque-a sobre a câmara para evitar bolhas de ar.

Agora coloque a câmara no sistema de iluminação equipada com um anel de luz LED branco para eliminar sombras e tornar os organismos claramente visíveis. Observe o comportamento de captura de presas usando um sistema de registro comportamental. Assim que a presa aparece, a larva converge seus olhos e dá uma volta em J para orientar seu corpo em direção à presa e capturá-la. Podemos quantificar o comportamento de captura de presas registrando o número de paramécios remanescentes na câmara durante um período de tempo. No protocolo a seguir, avaliaremos o comportamento de captura de presas da larva do peixe-zebra após a ablação a laser de neurônios específicos.

- Depois de configurar o sistema de registro comportamental e colocar uma larva em uma câmara de gravação de acordo com o protocolo de texto, use uma micropipeta para coletar 50 paramécios e colocá-los na câmara de gravação. Para colocar uma lamínula em cima da câmara de gravação, coloque uma pequena gota de água na lamínula antes de colocá-la na superfície da água da câmara de gravação para evitar a introdução de ar na câmara.

Coloque a câmara de gravação no sistema de iluminação. Em seguida, inicie a gravação em lapso de tempo a 10 quadros por segundo por 11 minutos. Por fim, faça a análise de acordo com o protocolo de texto.