0 visualizações • 4:45 min. • April 30th, 2023
- Primeiro, crie um recinto de três lados ao redor da área de teste para minimizar os estímulos externos que podem afetar o comportamento dos peixes. Configure iluminação difusa no teto para evitar reflexos na superfície da água. Em seguida, encha a arena, que é dividida em zonas escuras e claras, com água de habitat mantida a 28 graus Celsius.
Coloque a arena no recinto. Mantenha o tanque de habitat - contendo peixes a serem testados - fora do recinto. Deixe os peixes se aclimatarem para reduzir o estresse.
Agora, pegue suavemente um peixe do tanque de habitat e coloque-o no tanque de teste. Posicione o peixe perpendicularmente aos lados longos da arena para evitar viés em direção a qualquer zona. Observe o comportamento dos peixes usando um software de gravação e repita o teste para o resto dos peixes. Meça o tempo médio gasto por cada peixe nas zonas claras e escuras.
O peixe-zebra tende a passar mais tempo na zona escura quando está ansioso. No protocolo de exemplo, realizaremos um teste claro-escuro para observar o efeito da exposição ao etanol no comportamento do peixe-zebra.
- Obtenha uma arena claro-escura de 9 e 1/2 centímetros de largura por 55 centímetros de comprimento e 9 e 1/2 centímetros de profundidade com piso branco à prova d'água. Fixe papel branco e preto à prova d'água e não reflexivo nas paredes internas da arena usando Velcro, com metade da arena coberta de branco e metade coberta de preto. Encha a arena a uma profundidade de 5 centímetros com água do habitat a uma temperatura de 25 a 28 graus Celsius. Mantenha essa temperatura durante o teste.
Minimize os estímulos visuais externos construindo um recinto branco de três lados para a arena ser colocada. Certifique-se de que a área de teste tenha iluminação difusa que não cause reflexos na superfície da água, mas seja suficientemente brilhante para o software de rastreamento de movimento ou quantificação manual post hoc de imagens de vídeo. Em seguida, defina os parâmetros de gravação e análise de movimento do software de rastreamento de comportamento com uma duração de teste de 5 a 15 minutos, dependendo da questão de pesquisa.
Transporte o grupo de peixes a serem testados para a área de pesquisa no tanque de habitat e coloque-os fora do recinto da arena. Deixe o peixe se aclimatar por 10 minutos. Pegue suavemente um peixe do grupo apropriado e coloque no centro da arena claro-escuro, liberando cada peixe quando estiver posicionado paralelamente ao eixo longo da arena para evitar inclinar o peixe para a zona clara ou escura.
Comece a registrar o comportamento imediatamente após o animal ser solto. Fique atento a quaisquer problemas de software com o rastreamento do peixe ou para peixes pulando ou congelando. Após o término do teste, pesque suavemente e remova os peixes da arena para um tanque de retenção ou tanque de habitat. Gire a arena 180 graus depois que metade dos sujeitos tiver sido testada para evitar confusão devido a vieses resultantes de qual extremidade da arena está orientada para a extremidade aberta do recinto.
Comece a análise examinando o tempo gasto em zonas claras versus escuras. Para cada grupo e para cada peixe, obtenha o tempo relativo gasto nas zonas claras e escuras e analise usando um teste t de uma amostra para determinar se os grupos preferem significativamente uma área à outra. Para comparar preferências, calcule um índice de preferência subtraindo o tempo gasto na zona clara do tempo gasto na zona escura e compare as diferenças entre os grupos usando testes t. Compare vários grupos com uma análise de variância unidirecional, utilizando o teste post hoc de diferença significativa honesta de Tukey quando necessário.