Ensaio de evitação e timotaxia do peixe-zebra: um método de alto rendimento para examinar o comportamento larval em resposta a estímulos visuais aversivos

- Para começar, coloque cinco larvas em cada pista de uma placa de agarose de seis pistas. Adicione mais água de ovo, mas não encha demais as pistas. A água do ovo contém azul de metileno, que impede o crescimento de fungos. Deixe as larvas se aclimatarem por pelo menos 10 minutos para reduzir o estresse.

Agora coloque a placa do poço em uma câmara de imagem sobre a tela de um laptop. Foque a câmera na placa do poço. Encha a pista completamente com água de ovo.

Em seguida, registre o comportamento das larvas colocadas no fundo em branco tirando imagens de lapso de tempo. Exiba uma barra vermelha em movimento na tela do laptop e tire imagens de lapso de tempo das larvas em resposta à barra vermelha em movimento.

A forma vermelha é percebida como uma ameaça, um estímulo aversivo, e causa estresse às larvas. Em resposta, eles evitam a barra e demonstram tigmotaxia positiva. A tigmotaxia positiva é a resposta do peixe ao estímulo que busca contato com a parede e nada na borda da pista.

No protocolo de exemplo, analisaremos as respostas de evitação e tigmotáticas de larvas de peixe-zebra tratadas com compostos farmacêuticos ou toxinas ambientais.

- Para iniciar a captura de imagens, mov