0 visualizações • 4:22 min. • April 30th, 2023
- Comece adicionando 5 embriões em meio E3 a cada poço de uma placa de 96 poços e remova o excesso de meio com uma pipeta. Adicione o meio E3 contendo canamicina em cada poço para evitar contaminação. Deixe os embriões crescerem a 28 graus Celsius.
Dilua o composto de interesse com um solvente apropriado, como DMSO, para preparar várias concentrações ou doses e teste o efeito de cada dose em embriões em desenvolvimento. Quando os embriões atingirem o estágio desejado, pipetar cada solução estoque em poços individuais. Cubra o prato com uma tampa e agite-o suavemente para misturar o conteúdo. Deixe os embriões na placa do poço crescerem a 28 graus Celsius.
No momento desejado do desenvolvimento embrionário, coloque a placa do poço sob um microscópio adequado para examinar o fenótipo dos embriões. Você pode observar fenótipos como perda de olhos, atraso no crescimento ou perda de melanócitos nos embriões em desenvolvimento. No protocolo a seguir, testaremos uma biblioteca de compostos para inibidores de pequenas moléculas do desenvolvimento do prosencéfalo.
- Bibliotecas de moléculas pequenas são normalmente fornecidas em uma placa de origem de 96 poços com cada composto armazenado e
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