Ensaio de locomoção larval: método de alto rendimento para estudar a toxicidade neurocomportamental de um composto em larvas de peixe-zebra

- Para começar, cultive os embriões em 3 placas de Petri. A primeira é uma placa de controle que contém a solução de Hank - uma solução salina balanceada. A segunda e a terceira placas têm solução de Hank com um composto potencialmente neurotóxico em diferentes concentrações.

O composto neurotóxico na solução de exposição penetra na membrana externa dos embriões por difusão passiva e altera os processos do sistema nervoso, como atenção, coordenação e atividade muscular. Assim que os embriões se desenvolverem em larvas da idade apropriada, transfira cada larva para um poço individual de uma placa de 48 poços. Acompanhe a condição de tratamento para cada animal.

Transfira a placa do poço para uma plataforma de gravação e puxe a tampa para baixo. Deixe as larvas se aclimatarem por 10 minutos. Defina ciclos alternados de períodos claros e escuros usando o software.

As larvas do peixe-zebra normalmente exibem mais movimento no escuro e menos movimento na luz. Registar a distância total percorrida pelas larvas dos grupos de controlo e de exposição em cada período. Se o composto for neurotóxico, as larvas mostram ainda mais movimento no escuro e na luz do que os animais de controle.

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