0 visualizações • 3:27 min. • April 30th, 2023
- Comece com uma placa de Petri contendo embriões em meio E3. Adicione tricaína para anestesiar os embriões e feniltioúria, solução de PTU, para inibir a formação de pigmentos. Com a ajuda de um microscópio de dissecação, descorione os embriões.
Use uma pipeta de vidro para transferir um dos embriões descorionados para uma pequena placa de Petri com um fundo de vidro raso bem no centro e remova o excesso de meio. Em seguida, coloque uma solução de agarose em uma concentração ideal para minimizar a distorção e a motilidade do embrião em um tubo de microcentrífuga e aqueça-o. Abaixe a temperatura para 30 graus Celsius para evitar danificar o embrião devido ao calor.
Despeje a primeira camada de agarose sobre o embrião, preenchendo completamente o poço raso. Coloque outra tampa de vidro sobre o poço e adicione 1% de agarose por cima. A segunda camada mantém a lamínula no lugar.
Assim que a agarose solidificar, encha a placa de Petri com o meio E3 contendo tricaína. Esta é a terceira camada e mantém a agarose e o embrião hidratados. No protocolo a seguir, realizaremos a montagem em ágar em camadas de embriões de peixe-zebra para imagens de lapso de tempo estendido.
- Pouco antes da mon
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