Eletrofisiologia de grampo de remendo de células inteiras: um método para estudar as propriedades elétricas dos neurônios

- Comece colocando uma câmara de gravação contendo uma amostra em uma solução de banho, cuja composição corresponde ao ambiente extracelular fisiológico ou ao citoplasma, em um estágio de microscópio. Avance a micropipeta de registro, uma pipeta contendo um eletrodo de prata banhado em uma solução eletrolítica, que imita as condições intracelulares, em direção ao neurônio aplicando pressão positiva e faça contato com a membrana celular.

Mude suavemente da pressão positiva para a negativa para formar uma vedação firme entre a membrana e a pipeta. Defina um potencial de retenção no amplificador para manter a célula em uma tensão constantetage. Em seguida, rompa a membrana celular dentro da micropipeta aplicando sucção.

Uma vez que a membrana celular se rompe, o potencial de retenção causa o fluxo de íons através de canais iônicos dependentes de voltagem, criando um potencial de membrana, que é registrado pelo eletrodo de registro. Registre imediatamente o potencial de membrana. O eletrodo de gravação transmite o sinal para o amplificador de feedback, que subtrai o potencial de membrana do potencial de retenção - um osciloscópio, que apresenta uma exibição visual do potencial de membr