0 visualizações • 3:11 min. • April 30th, 2023
- Os neurônios propagam impulsos elétricos por meio de potenciais de ação. Quando o neurônio está em estado de repouso, há uma saída mais lenta de íons potássio do que a entrada de íons sódio, o que leva à mudança no potencial de membrana. Isso faz com que os canais de íons de sódio se abram e permitam a entrada de íons de sódio, gerando um impulso elétrico.
O método de estudar essas atividades em uma célula é chamado de eletrofisiologia. Comece o procedimento inserindo uma ponta de eletrodo secundário na narina de um peixe-zebra adulto. Em seguida, insira os eletrodos primários superficialmente, dentro do tectum óptico exposto, para medir a atividade neural extracelular.
O eletrodo primário mede o potencial da membrana extracelular de todas as células ao seu redor. O sinal representa o potencial de membrana combinado de todas essas células. O eletrodo detecta o sinal e o transmite para um amplificador - um osciloscópio - que apresenta uma exibição visual do potencial de membrana e um computador.
Observe as leituras e analise a diferença elétrica entre os eletrodos primário e secundário. A medição eletrofisiológica é uma comparação. No protocolo de exemplo, mediremos o efeito de compostos farmacológicos na atividade neural em um peixe-zebra adulto.
- Para registro de eletrofisiologia, desligue a torneira de intubação e desconecte rapidamente a trava de Leur que conecta a base de intubação ao gotejamento de tricaína. Mova a configuração de intubação intacta para o microscópio de eletrofisiologia e conecte-a ao sistema de perfusão. Ligue a água do habitat e perfunda a uma taxa de 1 mililitro por minuto por cerca de uma hora, a fim de lavar a tricaína.
Usando um micromanipulador, posicione o eletrodo secundário de forma que a ponta do eletrodo possa ser inserida na narina do animal ou no mergulho sob a mandíbula superior. Em seguida, insira a agulha do eletrodo primário na abertura da craniotomia. Em seguida, insira a agulha no tecido, de modo que a ponta fique posicionada bastante superficialmente dentro do tecto óptico.
Posições mais profundas do eletrodo podem resultar em um pequeno sinal elétrico. Para a coleta de dados, é usado o modo livre de lacunas a uma taxa de amostragem de 5.000 hertz, juntamente com o filtro passa-baixa de 0,1 kilohertz e um filtro passa-alta de 1 hertz. Iniciar o registo da actividade electrofisiológica quando a água do habitat tiver perfundido durante um mínimo de 45 minutos. Registre uma linha de base da atividade nativa por pelo menos 15 minutos antes da adição de drogas experimentais.