zPDX-Análise de Invasividade: Investigando o Comportamento Invasivo de Células Cancerígenas Metastáticas em Xenoenxertos de Embrião de Peixe-Zebra

Os xenoenxertos de embriões de peixe-zebra são úteis no estudo da invasão de células cancerígenas. Prepare modelos de xenoenxerto injetando células cancerígenas metastáticas marcadas com fluorescência e células não cancerosas no espaço perivitelino de dois embriões transgênicos. O espaço perivitelino é um espaço entre a periderme do embrião e o saco vitelino. Deixe os embriões crescerem pelo período desejado.

Durante esse período, as células cancerígenas metastáticas se dividem agressivamente no local da injeção, enquanto as células não cancerosas permanecem estáveis. Após a incubação, use uma pipeta pasteur para transferir os embriões para um prato de suspensão com fundo de vidro. Remova o excesso de água do ovo e posicione os embriões na posição desejada para a imagem. Mantenha uma lamínula em cima do prato e coloque-o sob um microscópio de campo claro.

Capture imagens e analise o comportamento invasivo de ambos os tipos de células. As células cancerígenas metastáticas tendem a invadir os vasos sanguíneos a partir do local da injeção. Eles se movem ao longo da circulação e, em seguida, invadem o tecido circundante para proliferar. Em contraste, as células não cancerosas permanecem no local da injeção. No protocolo de exemplo, injetaremos células de câncer de mama no espaço perivitelino e no ducto de Cuvier em modelos de xenoenxerto de peixe-zebra para estudar metástase.

Para visualizar a metástase, com uma pipeta pasteur, transfira o embrião de peixe-zebra injetado para uma placa de poliestireno com fundo de vidro e remova o excesso de água do ovo. Imagem de todo o corpo do embrião com um microscópio confocal ajustado para baixa ampliação para obter um padrão geral de disseminação de células tumorais.

Use um laser de 488 nanômetros para visualizar a vasculatura do embrião de peixe-zebra e um laser de 543 nanômetros para visualizar células tumorais implantadas marcadas com marcador fluorescente vermelho. Em seguida, escaneie o embrião em oito a dez etapas para adquirir uma imagem de alta qualidade.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.