Medição espacial da pressão do fluido intersticial tumoral: um método para medir a pressão do fluido intersticial

A pressão do fluido intersticial ou IFP é a força exercida pelo fluido nos espaços entre as células de um tecido. Primeiro, anestesiar um camundongo portador de tumor com isofluorano a 2% misturado com oxigênio e imobilizá-lo na tomografia computadorizada ou na plataforma robótica CT-IFP. Agora, injete na veia lateral da cauda de um camundongo lipossomas encapsulados com um agente de contraste para visualizar o tumor. Devolva o animal à gaiola e deixe-o se recuperar.

Entre 48 a 72 horas após a injeção, prenda o camundongo anestesiado na plataforma CT-IFP e selecione algumas posições uniformemente espaçadas no tumor para medir o IFP. Em seguida, lave a agulha do sistema IFP com uma solução salina de heparina antes da inserção. Coloque a agulha na posição selecionada e insira-a no tecido tumoral.

Agora adquira imagens em todas as posições e meça o IFP usando o software. O IFP no tumor geralmente é alto devido à sua natureza densa, vasos sanguíneos anormais e sistema linfático defeituoso. Isso pode levar ao acúmulo de lipossomas na periferia do tumor. No protocolo a seguir, demonstraremos a técnica para medir o IFP em um tumor sólido.

Para medir o IFP, prenda o animal na plataforma do robô CT-IFP, de modo que o tumor fique imobilizado e acessível ao sistema do robô CT-IFP. Obtenha uma microtomografia anatômica conforme demonstrado, carregue os dados de inserção da pré-agulha no software de alinhamento do robô CT-IFP e ajuste a janela e o nível para visualizar o tumor. Clique na borda do tumor em qualquer imagem, seguido pela seleção de uma segunda localização da borda no lado adjacente do tumor.

O software calculará uma série de posições ao longo de uma linha linear entre os dois pontos. Em seguida, selecione as coordenadas x, y e z para uma série de cinco a oito posições uniformemente espaçadas na lista. Em seguida, lave a agulha do sistema IFP com uma solução salina de heparina e insira as primeiras posições predeterminadas da agulha nas janelas de coordenadas XYZ do software de controle do robô CT-IFP.

Pressione o botão Ir para mover o robô para o local desejado. Em seguida, para cada posição da agulha, clique no botão Inserir agulha para inserir a agulha no tecido. Aperte e solte o tubo PE-20 para confirmar uma boa comunicação de fluido entre a agulha IFP e o tecido e observe que a medição do IFP aumenta e retorna ao valor de pré-pinçamento no software de aquisição IFP. Por fim, adquira uma tomografia computadorizada anatômica com a agulha inserida, clicando no botão Retrair agulha no final da varredura para remover a agulha do tecido.