Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 3:18 min. • April 30th, 2023
- Um parto intrabrônquico administra um agente experimental a um pulmão específico. Primeiro, fixe um camundongo anestesiado a uma placa de plástico em decúbito dorsal e canule a traqueia com um cateter estendido. Para canular o pulmão direito distal, gire a prancha a 30 graus e guie o cateter paralelamente à linha média do camundongo até sentir resistência.
Administre o agente experimental no cateter. Em seguida, com um conta-gotas, dispense ar para remover o agente do cateter. Retire o cateter e mantenha o mouse na posição por 30 segundos. Coloque o mouse em uma gaiola para recuperação.
Para administrar agentes experimentais ao pulmão esquerdo distal após a canulação intratraqueal, gire a placa plástica para 74 graus negativos. Avance suavemente o cateter para o brônquio principal esquerdo. Gire a placa para menos 30 graus para permitir a assistência gravitacional para a administração de agentes experimentais. Forneça mais volume do agente experimental proporcional ao lobo pulmonar esquerdo ter uma área maior. Com um conta-gotas, dispense ar e retire o cateter. Mantenha o mouse na posição por 30 segundos e coloque-o em uma gaiola para se recuperar.
O protocolo a seguir mostra a administração do corante azul de Evans por administração intrabrônquica para deposição seletiva em um pulmão de camundongo.
- Para canulação lobar seletiva do pulmão direito distal, após a intubação intratraqueal, gire a placa plástica 30 graus e guie o cubo do cateter paralelamente à linha média do camundongo até a profundidade apropriada com base no peso, conforme indicado na tabela. Usando uma ponta de carregamento de gel, aplique 20 microlitros de corante azul Evans a 0,3% no cateter, seguido por 1 a 2 alíquotas de 100 microlitros de ar por conta-gotas de vidro. Em seguida, retire o cateter e mantenha o camundongo na posição por 30 segundos antes de colocar o animal em um cobertor quente com monitoramento até a recuperação total.
Para canulação lobar seletiva do pulmão esquerdo distal, após intubação intratraqueal, gire a placa plástica menos 74 graus e avance suavemente o cateter para o brônquio principal esquerdo enquanto coloca uma pressão modesta a 90 graus para baixo e em direção ao suporte para livros. Depois de canular os segmentos pulmonares inferiores esquerdos, gire a placa plástica menos 30 graus e forneça 40 microlitros de corante azul Evans a 0,3% com uma ponta de carregamento de gel. Em seguida, forneça 1 a 2 alíquotas de 100 a 300 microlitros de ar por meio de conta-gotas de vidro e retire o cateter para permitir que o camundongo se recupere conforme demonstrado.