Cultura tridimensional de células de carcinoma de pulmão: um método para estudar as interações célula-matriz

- Primeiro, descongele os frascos da matriz da membrana basal a 4 graus Celsius durante a noite. A matriz da membrana basal consiste em proteínas presentes no microambiente tumoral que ajudam a manter as características das células cancerígenas in vitro. No dia seguinte, coloque o frasco da matriz da membrana basal no gelo para reter a matriz no estado líquido. Leve as células de câncer de pulmão para um tubo de centrífuga pré-resfriado e centrifugue a 4 graus Celsius. Aspire o sobrenadante e bata suavemente para desalojar o pellet e colocá-lo no gelo. Em seguida, adicione um volume apropriado de mistura de membrana basal a este tubo e misture para fazer uma suspensão celular uniforme. Execute todas as etapas em baixa temperatura para evitar que a membrana basal gelifique.

Transfira um volume apropriado de suspensão de matriz celular para o centro de cada poço em uma placa de poço pré-resfriada, cobrindo todo o poço. Incube a placa do poço para que a matriz se solidifique. Examine ao microscópio para garantir uma distribuição uniforme das células dentro da matriz. Adicione meio completo de cultura 3D em cada poço e incube a 37 graus Celsius. Este meio facilita as interações da matr