Co-cultura 3D de células de câncer de pulmão com CAFs: um sistema modelo in vitro para estudar a progressão do tumor

- Em co-culturas 3D, vários tipos de células são cultivados juntos em matrizes como uma matriz de membrana basal, que imita o microambiente natural da matriz extracelular, facilitando as interações célula-célula e célula-matriz. Para estabelecer uma co-cultura 3D incorporada, prepare uma suspensão uniforme de fibroblastos associados ao câncer ou CAFs e células de câncer de pulmão tomadas em duas proporções é para uma, na matriz da membrana basal. Mantenha a suspensão no gelo para evitar a solidificação da matriz à temperatura ambiente.

Transferir um volume adequado de suspensão para uma placa de cultura de células. Incube a 37 graus Celsius pela duração necessária para co-incorporar as células na matriz. Para estabelecer uma co-cultura 3D sobreposta, prepare uma suspensão de células de câncer de pulmão na matriz da membrana basal, na densidade celular desejada. Mantenha a suspensão no gelo. Pipetar um volume adequado desta suspensão de matriz celular para uma placa de cultura de células. Incube a 37 graus Celsius para configurar a monocultura de células cancerígenas incorporadas.

Posteriormente, transfira o volume desejado de CAFs suspensos em meios de cultura preferidos, sobre as