Ensaio de Xenoenxerto de Peixe-Zebra: Um Método para Avaliar a Eficácia Anticancerígena da Terapêutica na Tumorigenicidade em Peixe-Zebra In Vivo

- Primeiro, coloque os ovos em uma placa de Petri e adicione a solução de Danieau para manter os ovos recém-coletados. Adicione fenil tioureia para inibir a pigmentação e incubar por alguns dias. Após a incubação, descorione os embriões com uma pinça afiada e deixe-os crescer ainda mais.

Em seguida, semeie o número desejado de células cancerígenas em um frasco de cultura e incube durante a noite. Agora adicione compostos anticancerígenos e incube ainda mais. Após a incubação, adicione corante rastreador de células fluorescentes, que se ligará à membrana celular e manchará as células.

Em seguida, adicione tripsina para dissociação celular e dilua as células na solução de PBS vermelho de fenol antes do procedimento para avaliar o pH. Montar embriões de peixe-zebra anestesiados em uma placa de ágar. Agora carregue o microcapilar com suspensão de células cancerígenas e injete-o no saco vitelino dos embriões.

Transferir os embriões para placas de cultura contendo a solução de Danieau e incubar ainda mais. Em seguida, transfira alguns embriões em uma lâmina de vidro e adicione metilcelulose para imobilizá-los. Coloque a lâmina sob um microscópio de fluorescência e quantifique o tamanho d