Extração de miRNA: Um método para extrair miRNA de amostra de plasma

- MicroRNAs, ou miRNAs, são pequenos RNAs não codificantes envolvidos na regulação gênica. Suas expressões são alteradas durante o câncer e, portanto, são potenciais biomarcadores de câncer. Para iniciar o isolamento do miRNA, pegue uma amostra de sangue total recém-coletada e centrifugue a 4 graus Celsius para separar o plasma das células sanguíneas. Transferir o sobrenadante para um novo tubo e centrifugar novamente para obter um sobrenadante de plasma mais límpido. Extrair o sobrenadante, tratar com solução de homogeneização refrigerada, seguida de tampão de lise para homogeneizar a amostra. Adicione a solução enzimática de proteinase K para degradar proteínas, particularmente as nucleases que, de outra forma, digeririam o RNA durante as etapas a jusante.

- Em seguida, carregue o lisado no poço designado de um cartucho extrator de ácido nucleico específico do instrumento pré-montado. Adicione a solução de DNase 1 ao poço apropriado para eliminar o DNA genômico da amostra. Adicione água livre de nuclease ao tubo de eluição montado no cartucho para condicionamento antes do isolamento do miRNA. Carregue o conjunto do cartucho no extrator de ácido nucleico. Selecione e execute o sof