Estimulação ex vivo de células T no tumor pancreático: um método para aumentar a produção de citocinas em células T

- As células T ativadas se movem para o microambiente tumoral pancreático, onde liberam citocinas como interferon-gama, ou IFN gama, e fator de necrose tumoral alfa, ou TNF alfa, que ajuda a mediar uma resposta antitumoral eficaz. À medida que as citocinas saem rapidamente da célula T, os níveis intracelulares podem ser indetectáveis. Portanto, a célula T requer estimulação para aumentar a produção basal de citocinas para estudar seu papel terapêutico no tumor.

Comece tomando uma suspensão de células tumorais do pâncreas do camundongo. Agora, trate as células T presentes na suspensão celular com um coquetel de estimulação de citocinas e incube a mistura pelo tempo desejado. Este coquetel facilita a liberação de íons de cálcio do retículo endoplasmático para o citoplasma. Altos níveis de cálcio, por sua vez, ativam certos fatores de transcrição nuclear, levando a um aumento na produção de citocinas nas células T.

Em seguida, trate as células com um coquetel inibidor de transporte de proteínas e incube o tubo. Este coquetel bloqueia o transporte de citocinas do retículo endoplasmático para o complexo de golgi, resultando no acúmulo de citocinas dentro da célula. Finalmente, core as c