Dinâmica do cálcio de imagem em células pancreáticas: uma técnica para estudar mudanças em tempo real na concentração citosólica de cálcio em ilhotas pancreáticas

- As ilhotas pancreáticas são um aglomerado de células pancreáticas produtoras de hormônios que desempenham um papel crucial na manutenção da homeostase da glicose. A concentração elevada de glicose desencadeia o fechamento dos canais de íons de potássio, impedindo o efluxo de íons de potássio, levando à despolarização da membrana. Em consequência, os canais de íons de cálcio dependentes de voltagem se abrem, permitindo o influxo de íons de cálcio. Esse aumento da concentração citosólica de cálcio estimula a liberação de hormônios como a insulina. Em tempo real, para obter imagens da dinâmica do cálcio citosólico, transfira algumas ilhotas carregadas com corante indicador de cálcio adequado entre as paredes espaçadoras de uma malha fina pré-montada.

Posicione a malha de cabeça para baixo em uma lamínula colocada dentro da câmara de imagem de um microscópio invertido. Coloque uma malha grossa e peso para imobilizar as células. Adicione a solução de imagem na câmara. Em seguida, configure um sistema de perfusão para introduzir glicose ou um hormônio de teste de interesse. Dentro das células, indicadores fluorescentes de cálcio pré-carregados relatam qualquer aumento nas concentrações