Isolamento primário de células acinares: um método para isolar células acinares do pâncreas de camundongos

- Uma célula acinar pancreática é uma célula exócrina que contém uma variedade de enzimas digestivas. Às vezes, em resposta à sinalização oncogênica, a célula acinar se converte em uma célula ductal. Esta célula ductal pode mais tarde se tornar cancerosa. Portanto, é vital isolar as células acinares para estudar seu papel na progressão do câncer de pâncreas.

Comece isolando o pâncreas de um camundongo sacrificado. Adicione o pâncreas a um recipiente de pesagem contendo uma solução salina balanceada suplementada com um antibiótico. Pique o pâncreas em pedaços pequenos usando uma tesoura e adicione o tecido pancreático a um tubo. Em seguida, adicione a solução de colagenase aos pedaços do pâncreas no tubo.

A colagenase digere o colágeno que mantém o tecido unido, de modo que o tecido se quebre em pedaços finos. Agora, adicione meios contendo soro ao tubo e coloque o tecido no gelo. Isso ajuda a interromper a ação da colagenase.

Filtrar o tecido e o meio duas vezes, diminuindo progressivamente o tamanho da malha do filtro de cada vez para obter uma suspensão de tecido fino. Por fim, centrifugue a suspensão resultante para coletar as células acinares do pellet. Remova o sobrenadante e