Indução de metaplasia acinar-ductal: um método para estudar a diferenciação de células acinares para células ductais em cultura 3D ex vivo

- A porção exócrina do pâncreas constitui células acinares e células ductais. As células acinares sintetizam e secretam enzimas digestivas em seu lúmen. As células ductais revestem o tubo que fornece essas enzimas ao intestino delgado. Para se adaptar ao estresse genético e ambiental, as células acinares sofrem conversão morfológica e funcional em células semelhantes a ductos, denominadas metaplasia acinar-ductal, ou ADM.

Às vezes, a ADM pode levar ao aparecimento de câncer de pâncreas. Para induzir a ADM ex vivo, prepare uma suspensão de células de colágeno resfriada combinando células acinares primárias com gel de colágeno mantido em gelo para evitar a solidificação da matriz. Trate a suspensão com um estimulante ou inibidor ADM de teste de interesse.

Distribua a suspensão em uma placa de cultura e incube para facilitar a solidificação do colágeno e incorporar as células dentro. Em seguida, pipete um volume adicional de meio contendo o estimulante ou inibidor ADM de teste de interesse sobre a camada de células de colágeno solidificadas.

Incubar a placa durante um período adequado. Com a indução da metaplasia acinar-ductal, as células acinares primárias em forma piramidal se trans