Transplante de tumor ortotópico de homoenxerto: uma técnica para gerar modelos de camundongos com tumor pancreático

- Durante o transplante de tumor de homoenxerto ortotópico, células tumorais ou fragmentos tumorais de um doador canceroso são transplantados para um receptor pertencente à mesma espécie em um órgão ou local que corresponde ao histotipo do tumor. Comece pegando um camundongo doador anestesiado com um tumor, contendo células de origem pancreática. Esterilize a área e colha cirurgicamente o tumor. Lave o lenço para remover o sangue e pique-o em fragmentos. Em seguida, coloque um camundongo receptor anestesiado em uma posição lateral direita e esterilize sua área abdominal. Exponha cirurgicamente o baço.

Em seguida, puxe suavemente uma parte do pâncreas abaixo do baço. Coloque o fragmento do tumor no pâncreas e suture-os. Feche o abdômen e deixe o rato se recuperar em uma gaiola. Monitore o camundongo receptor diariamente para observar o crescimento do tumor pancreático ortotópico. No protocolo a seguir, mostraremos o transplante ortotópico de homoenxerto de adenocarcinoma ductal pancreático de um camundongo doador C57 preto 6 para o pâncreas de um camundongo receptor C57 preto 6.

- Monitore o peso corporal de camundongos C57 black 6 usando uma balança. Além disso, monitore o volume tumoral de camundongos doadores portadores de tumor por medição de paquímetro. Após a eutanásia do animal em um capuz de risco biológico de acordo com o protocolo, esterilize a pele ao redor do tumor usando cotonetes de iodóforo. Depois de remover cirurgicamente o tumor, conforme detalhado no protocolo de texto, coloque o tumor em uma placa de Petri contendo 20 mililitros de PBS que foi pré-resfriado a quatro graus Celsius. Se houver sangue contaminante, transfira o tumor para outra placa de Petri e lave o tumor com PBS.

Corte o tumor ao meio. Remova qualquer pele, vasos, calcificação e/ou necrose extras. Escolha apenas pedaços intactos de tumor e coloque-os em um tubo de centrífuga estéril de 50 mililitros. Adicione 20 mililitros de PBS antes de transportar o tubo para uma sala de animais separada para estudos farmacológicos. Para se preparar para o implante ortotópico, fixe o mouse totalmente anestesiado em uma placa experimental na posição lateral direita. Desinfete a pele ao redor do baço com iodo e depois desiodado-a com álcool etílico a 75%.

Encontre o ponto médio do baço e faça uma incisão vertical de um centímetro no abdômen para expor o baço. Retire suavemente uma parte do tecido do pâncreas sob o baço usando uma pinça de ponta chata e suture um pedaço de tumor de homoenxerto de camundongo do camundongo semente no pâncreas do camundongo receptor com sutura cirúrgica absorvível 9-0. Feche o abdômen com uma sutura de seda 6-0 por costura dupla. Alcance a homeostase por compressão.

Após terminar a implantação do tumor, mantenha os animais em uma gaiola quente, desde que não ocorra sangramento ou vazamento de tecido tumoral. Monitore o animal até que ele recupere a consciência suficiente para manter a decúbito esternal. Devolva o animal ao biotério após a recuperação total da anestesia. Monitore os camundongos portadores do tumor palpando o abdômen próximo ao baço e selecione os camundongos portadores de tumores ortotópicos.

• Orthotopic Homograft Transplantation - Procedure of transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient at a corresponding organ.
• Pancreatic Cancer Homograft Models - Scientific models used for studying pancreatic cancer by transplanting tumor homografts.
• Orthotopic - Refers to the transplantation of cells or tissues into their natural site of occurrence in the body.
• Tumor Homograft Models - Research models involving the transplantation of tumor tissues between same-species subjects.
• Mouse Cancer Models - Laboratory mice bred or genetically engineered for use in cancer research.

• Introduce Orthotopic Homograft Transplantation – This procedure involves transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient (e.g., mouse tumor).
• Key Concepts – Pancreatic Cancer Homograft Models allow us to study pancreas cancer progression (e.g., tumor mouse models).
• Underlying Mechanisms – Transplantation is done at matching organ site for accurate reflection of cancer progression.
• Connect to Experiment – The procedure mentioned is used to establish a mouse model for studying pancreatic cancer progress.

• Practical Applications – Allows for accurate representation of cancer progression enhancing research (e.g., tumor mouse model).
• Industry Impact – Impact on medical and biotechnological sectors (e.g., healthcare).
• Societal Importance – Enhances understanding of cancer which could lead to better treatments (e.g., health).
• Link to Scientific Advancements – Establishes a platform for scientific research and innovations in cancer treatment.