Isolamento de células-tronco PDAC: um método para isolar células-tronco cancerígenas de tumores pancreáticos

- As células-tronco do câncer de pâncreas ou CSCs são um subconjunto de células cancerígenas auto-renováveis e podem dar origem a todo o tumor. As CSCs residem em um nicho bem protegido que consiste em outras células, como fibroblastos, células imunológicas, células endoteliais e componentes da matriz extracelular, como citocinas e fatores de crescimento. As interações que acontecem entre as células em tal ambiente ajudam as CSCs a se propagar e aumentar o crescimento do tumor.

Para estudar as propriedades das CSCs, nós as isolamos dos tumores pancreáticos. Comece tomando a suspensão celular do tecido tumoral pancreático humano em um meio de crescimento CSC. Em seguida, semeie a suspensão, consistindo principalmente de fibroblastos e CSCs, em uma placa revestida de gelatina e incube-a pela duração desejada. Os fibroblastos aderem à superfície da gelatina, deixando as CSCs flutuantes na suspensão celular.

Pegue uma pequena quantidade de suspensão celular e adicione azul de tripano. Pipete esta mistura para um hemocitômetro e conte o número de células viáveis. O azul de tripano entra nas células mortas e as mancha de azul, deixando as células vivas incolores. Por fim, armazene os CSC