Monitoramento de microambiente tumoral baseado em PTM: um método para rastrear mudanças na rigidez da ECM usando esferoides tumorais

- Na invasão tumoral, as células tumorais periféricas sofrem transição epitelial para mesenquimal ou EMT, resultando na degradação local da matriz extracelular ou MEC. Podemos estudar a interação das células tumorais com a MEC in vitro.

Para estudar essas interações, transfira um esferóide pré-formado derivado de células tumorais pancreáticas para uma placa contendo andaime de colágeno junto com sondas traçadoras fluorescentes incorporadas e meios de cultura. O esferóide tumoral libera proteases, que degradam o colágeno e reduzem a rigidez da MEC, resultando no livre movimento das sondas traçadoras na MEC.

Incube a placa pelo tempo desejado. Observe a amostra sob um microscópio de luz para observar a grade de pontos de amostra no andaime de colágeno e registrar dados de vídeo deles. A região da matriz próxima ao esferóide mostra degradação máxima do colágeno. Portanto, aumentou o movimento da sonda. Em contraste, a área mais distante do esferóide mostra menos degradação do colágeno, resultando em movimento restrito das moléculas da sonda.

Essa técnica de examinar as propriedades reológicas da ECM medindo as trajetórias das partículas traçadoras é conhecida como microrreologia de ra