Digestão enzimática tumoral: um procedimento para gerar suspensão de células tumorais a partir de modelos de camundongos com câncer de xenoenxerto derivados de pacientes

- Modelos de xenoenxerto derivados de pacientes, ou PDX, são modelos animais experimentais com células tumorais ou fragmentos tumorais implantados diretamente de um paciente humano. Esses modelos simulam o microambiente do tecido tumoral humano, permitindo a propagação do tumor. Para gerar suspensões de células tumorais, primeiro colha a porção tumoral derivada do paciente do camundongo receptor.

Pique os segmentos do tumor para obter fragmentos menores. Trate os fragmentos com uma solução digestiva contendo um coquetel de enzimas colagenase, hialuronidase e desoxirribonuclease. As enzimas colagenase e hialuronidase digerem a matriz extracelular que mantém o tecido unido, facilitando a liberação de células individuais na suspensão.

A desoxirribonuclease degrada qualquer DNA livre liberado das células lisadas. Agora, filtre a amostra digerida através de filtros de células para remover qualquer tecido não digerido e detritos e obter suspensões unicelulares. Centrifugue para separar as células. Rejeitar o sobrenadante que contém a mistura de digestão e ressuspender o sedimento celular em meios frescos.

Finalmente, suplemente com células estromais linfonodais na proporção desejada para