Estabelecendo modelo de camundongo com metástases experimentais: implantando células organoides CRC que expressam GFP no modelo PDX para detectar micrometástases

- As micrometástases são um pequeno grupo de células cancerígenas que se desprendem de um tumor primário e se espalham para diferentes partes do corpo através do sangue ou dos gânglios linfáticos. Para detectar micrometástases, suspenda as células organoides do câncer colorretal no PBS para manter o pH e carregar a suspensão celular em uma seringa. Em seguida, coloque um camundongo anestesiado em decúbito ventral em uma cama cirúrgica. Faça uma pequena incisão com uma tesoura na parte inferior do flanco esquerdo e exponha o baço. Puxe suavemente o baço para fora usando uma pinça e injete lentamente a suspensão celular no baço. Feche a incisão com suturas e retorne o animal à gaiola. Monitore-o até que ele se recupere.

Após o período desejado de injeção, sacrifique o camundongo para dissecar tumores primários e diferentes tecidos. Observe os tecidos dissecados sob um microscópio de fluorescência. As células cancerígenas que expressam GFP desenvolvem um tumor primário no local injetado no baço. Algumas células cancerígenas do tumor primário se movem para um órgão diferente, geralmente o fígado, para formar colônias micrometastáticas. No protocolo a seguir, estabeleceremos um modelo e