Preparação de Bloqueio de Tecido de Pele Congelada: Um Protocolo para Preservar Amostras de Melanoma Cutâneo da Pele Dorsal Murina

0 visualizações • 4:23 min. • April 30th, 2023

- As células-tronco dos melanócitos quiescentes, em resposta à radiação UV ou depilação do cabelo, são ativadas. As células-tronco do melanoma ativado podem levar ao melanoma cutâneo - uma forma de câncer de pele. Para estudar o melanoma, preparamos blocos de tecido cutâneo congelado para reter as estruturas nativas de DNA e proteínas durante o procedimento de fixação.

Comece colocando um camundongo melanoma sacrificado em uma cama cirúrgica e remova os pelos da região dorsal da pele acima da cauda. Extirpar a pele e cobri-la com um papel de filtro. Em seguida, mergulhe o papel de filtro contendo tecido cutâneo em formalina tamponada neutra pelo tempo desejado. A formalina penetra no tecido da pele e se liga aos aminoácidos, o que causa a reticulação de proteínas, levando à fixação do tecido.

Retire o tecido da pele do papel e corte o tecido para obter pedaços do tamanho desejado. Agora, incorpore os pedaços de tecido verticalmente em um criomoldor preenchido com meio OCT e coloque os criomoldes em gelo seco. OCT é uma matriz de amostra que se solidifica no congelamento e forma uma camada gelatinosa ao redor da amostra de tecido que a mantém no lugar. Use os blocos congelados para

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