Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 5:54 min. • April 30th, 2023
- A pele consiste em várias células que preenchem suas diferentes camadas. Os melanócitos, as células produtoras de melanina, localizam-se na junção epidérmica-dérmica, enquanto os fibroblastos, as células geradoras de tecido conjuntivo, residem na derme.
Para isolar rapidamente melanócitos e fibroblastos, comece pegando o tronco de um filhote de camundongo sacrificado. Corte a pele ventralmente ao longo do comprimento do tronco. Retire a pele que contém a camada epidérmica e dérmica e pique o tecido em pequenos pedaços.
Agora, trate com um tampão de digestão contendo enzimas tripsina e colagenase que degradam a matriz extracelular, liberando as células em suspensão. Centrifugue para peletizar as células e descartar o sobrenadante. Ressuspenda as células em meio melanócito e transfira a suspensão para uma placa multipoços.
Durante a cultura, a maioria dos fibroblastos adere ao fundo do poço, enquanto os melanócitos e outras células epidérmicas permanecem em suspensão. Aspire as células suspensas e adicione meios específicos de fibroblastos à cultura de fibroblastos para promover seu crescimento. Transfira a suspensão aspirada para um poço revestido de colágeno fresco para ajudar na
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos