Ensaio de migração de células-tronco tumorais cerebrais (BTSC) para estudos de tratamento medicamentoso: uma técnica de imagem de células vivas in vitro para analisar o efeito do tratamento medicamentoso na migração de BTSCs

As células-tronco tumorais cerebrais ou BTSCs, uma subpopulação de células tumorais cerebrais, podem iniciar o crescimento e metástase do tumor, tornando-as alvos promissores para a terapia do câncer. Para estudar o efeito dos medicamentos na migração de BTSC in vitro, primeiro prepare suspensões uniformes de BTSCs em um meio adequado. Trate uma das suspensões com o medicamento de interesse.

Enquanto isso, obtenha uma placa de quimiotaxia de vários poços composta por inserções membranosas que separam cada poço em câmaras superior e inferior. Pipeta desejada proteína da matriz extracelular para as câmaras inferiores e inserções membranosas. Incubar para facilitar a polimerização da proteína.

Adicione um meio basal adequado contendo o quimioatraente desejado nas câmaras inferiores e coloque sobre as inserções membranosas. Em seguida, semeie a suspensão de BTSC tratada com drogas e não tratada em inserções membranosas. Imagem da placa por um período prolongado usando microscopia de células vivas.

Em cultura, as BTSCs aderem à matriz proteica da inserção. Em resposta ao gradiente de concentração de quimioatraente estabelecido entre as câmaras superior e inferior, as BTSCs não tratadas