Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 1:21 min. • March 4th, 2025
Pegue uma seção de tecido cerebral de um camundongo submetido a hipoperfusão cerebral crônica leve, ou MCCH, e injetado com peptídeos beta-amilóides.
A MCCH é caracterizada pela redução do fluxo sanguíneo para o cérebro. Isso limita o suprimento de oxigênio e nutrientes para a camada de células endoteliais dos vasos sanguíneos cerebrais, danificando as células.
O dano aumenta a permeabilidade da parede vascular, permitindo que os peptídeos beta-amilóide injetados se acumulem na parede e formem placas.
Lave a seção com um tampão para remover produtos químicos residuais.
Incube com tioflavina S, um corante fluorescente que se liga às placas amilóides.
Lave a seção manchada com concentrações decrescentes de álcool para remover qualquer corante não ligado e reidratar o tecido.
Coloque a seção no tampão para manter a hidratação.
Monte a seção usando um meio de montagem que preserve a intensidade de fluorescência do corante.
Sob um microscópio de fluorescência, examine a presença de depósitos de amiloide marcados com fluorescência para confirmar a agregação beta-amilóide induzida por MCCH.