Expressão do operon de luminescência em bactérias bioluminescentes marinhas

Comece com uma cepa bacteriana bioluminescente marinha carregando o operon de luminescência, que codifica a luciferase e as enzimas necessárias para a síntese do substrato.

Listre a tensão em uma placa de ágar rica em nutrientes suplementada com água do mar artificial para imitar a salinidade nativa e apoiar o crescimento.

Incubar para obter colônias discretas e, em seguida, isolar e inocular uma única colônia em meio líquido contendo água do mar artificial.

Incubar com agitação para promover o crescimento durante a noite na fase exponencial.

Transfira um volume definido da cultura durante a noite para um meio fresco e incube-o para aumentar a densidade bacteriana.

À medida que a população se expande, as bactérias liberam autoindutores, sinalizando moléculas que se acumulam e se difundem nas células, onde se ligam a receptores intracelulares, ativando o operon de luminescência.

Essa ativação induz a expressão da luciferase e a biossíntese do substrato.

A luciferase catalisa a oxidação do substrato, emitindo luz azul-esverdeada.

Monitore a cultura para bioluminescência como um indicador de ativação do operon de luminescência e emissão de luz em bactérias marinhas.

Depois de preparar o meio d