JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologia
0 vistas • 2:22 min • October 30th, 2025
Comece com um camundongo anestesiado em decúbito dorsal, com o pescoço raspado.
Desinfete a área raspada.
Faça uma incisão no pescoço e, em seguida, disseque o músculo para expor a traqueia, a via aérea que leva ao trato respiratório inferior, incluindo os pulmões.
Pegue uma seringa pré-carregada com bactérias patogênicas para o pulmão, posicionada entre dois pequenos volumes de ar.
Insira a agulha na traqueia e injete o primeiro volume de ar para limpar a traqueia.
Em seguida, administre o inóculo bacteriano, seguido pelo segundo volume de ar para aumentar a dispersão bacteriana mais profundamente no trato respiratório inferior.
Segure brevemente o mouse verticalmente para promover uma distribuição uniforme de bactérias por todo o trato respiratório inferior.
Sele a incisão com adesivo tecidual e permita que o camundongo se recupere.
Este método permite a entrega direta de patógenos no trato respiratório inferior, contornando as barreiras das vias aéreas superiores.
Comece anestesiando o mouse e verificando se ele está adequadamente anestesiado com uma pitada no dedo do pé.
Em seguida, posicione o mouse em decúbito dorsal e raspe a área ventral do pescoço. Desinfete a pele exposta. Agora, levante a pele da parte ventral superior do pescoço com uma pinça de dente de rato e, usando um bisturi, faça uma incisão de meio a um centímetro acima do timo.
Em seguida, separe cuidadosamente o músculo para expor a traqueia. Na traqueia, injete lentamente 50 microlitros de ar, seguidos por 50 microlitros de NTHi preparado, seguidos por outros 50 microlitros de ar.
Após a injeção, mantenha o animal na vertical por cerca de um minuto. Em seguida, feche a incisão com adesivo tecidual e mantenha o camundongo lateralmente reclinado e aquecido por cerca de 10 minutos.
Este artigo descreve um método para a entrega direta de bactérias patogênicas para o pulmão no trato respiratório inferior de camundongos anestesiados. A técnica permite contornar as barreiras das vias aéreas superiores, facilitando o estudo de infecções respiratórias.
A administração bacteriana intratraqueal permite a introdução direta do patógeno nas vias respiratórias inferiores, contornando as defesas das vias aéreas superiores para modelar infecção pulmonar com alta fidelidade. Essa abordagem possibilita a eliminação mecanicista de candidatos antimicrobianos e anti-inflamatórios ao fornecer leituras reprodutíveis e quantitativas da carga bacteriana e da resposta do hospedeiro. Ela se alinha aos fluxos de trabalho de descoberta precoce, nos quais a validação do alvo exige sistemas relevantes à doença que reflitam a fisiopatologia pulmonar humana.
O método se insere no continuum de descoberta, desde a validação do alvo até a otimização do composto líder, no qual modelos de infecção pulmonar orientam a eficácia do composto e o perfil de segurança antes do avanço pré-clínico.
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Última atualização: 29 agosto 2026