Avaliação da permeabilidade intestinal em C. elegans após exposição bacteriana

Veja C. Vermes elegans cultivados em placas de ágar ricas em nutrientes contendo E. coli para a condição controle e Pseudomonas aeruginosa para a condição do patógeno.

Durante a incubação, os vermes se alimentam de bactérias que colonizam o lúmen intestinal.

No controle, o epitélio intestinal permanece intacto, enquanto as toxinas liberadas pelo patógeno causam danos epiteliais.

Lave as minhocas com um tampão e transfira para placas suplementadas com traçadores fluorescentes e bactérias inativadas por calor como fonte de alimento.

No controle, os traçadores fluorescentes ingeridos permanecem no intestino, enquanto nos vermes infectados por patógenos, eles cruzam o epitélio danificado e entram na cavidade corporal.

Lave as minhocas novamente e coloque-as em pratos novos. Depois, transferi-as para uma placa de ensaio multipoço contendo um fixador para preservar a estrutura celular.

Remova o fixador. Depois, adicione um suporte de montagem para imagem.

Observe usando um sistema de imagem de fluorescência.

Aumento da fluorescência na cavidade corporal de P. Vermes expostos a aeruginosa indicam permeabilidade intestinal induzida pelo patógeno.

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