Um modelo de camundongo para estudar a transição patogênica de Streptococcus pneumoniae após coinfecção viral

0 vistas3:17 min • March 31st, 2026

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Comece com Streptococcus pneumoniae cultivado em biofilme, um colonizador nasofaríngeo assintomático, suspenso em um tampão

Administre a suspensão intranasal a um rato não anestesiado, permitindo a inalação no trato respiratório superior.

No epitélio nasofaríngeo, as bactérias estabelecem um biofilme que facilita a colonização e suprime a produção de citocinas antivirais pelas células hospedeiras.

Após a anestesiação, estenda a língua do camundongo para acessar a traqueia.

Administre o vírus da influenza A na traqueia para infectar o trato respiratório inferior.

Após a recuperação do camundongo, inocule imediatamente o vírus intranasal para atingir o trato respiratório superior.

A infecção viral desregula o sistema imunológico do hospedeiro e danifica o tecido mucoso, desencadeando a dispersão bacteriana para o trato respiratório inferior.

No ambiente pulmonar alterado pelo vírus, as bactérias fazem a transição para patógenos invasores, induzindo inflamação pulmonar e disseminação sistêmica.

A infecção também suprime a função dos neutrófilos, reduzindo a eliminação bacteriana.

Esse modelo de co-infecção permite a investigação das interações hospedeiro-microrganismo.

Descongele as alíquotas cultivadas em biofilme no gelo e fie a 1.700 g por cinco minutos. Remova e descarte cuidadosamente o sobrenadante sem atrapalhar a bola. Depois, lave o pellet resuspendendo-o em 1 mililitro de PBS e gire novamente. Remova o sobrenadante e resuspenda o pellet no volume necessário para atingir a concentração desejada.

Inocule o camundongo preto C57 seis machos por via intranasal com 5 vezes 10 até a sexta unidade formadora de colônia ou CFU, pipeteando 5 microlitros do inóculo diluído em cada naris. Após a inoculação, segure o rato firmemente, estabilizando a cabeça até que o volume seja inalado. Uma vez que o vírus tenha descongelado, dilua-o no PBS até a concentração desejada.

Coloque lubrificante oftálmico nos olhos do camundongo antes da anestesia. Infecte imediatamente o camundongo anestesiado com 50 microlitros de 20 unidades formadoras de placa, ou PFU, do vírus da influenza A ou IAV intratraquealmente, usando pinças sem filo para puxar a língua da boca e pipetar o volume de líquido pela traqueia. Após a recuperação, inocule intranasal 10 microlitros de 200 UFP de IAV usando o método de inoculação descrito anteriormente.

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Última atualização: 1 agosto 2026