Name: Princípios de Cirurgia de roedores para o Cirurgião Nova (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-06T20:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: Aprenda os princípios de cirurgia asséptica em roedores, incluindo preparação do campo estéril, anestesia e cuidados pós-operatórios. Este método essencial capacita novos cirurgiões a minimizar infecções e garantir o bem-estar animal.

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1. Antes de realizar a cirurgia, saiba que existem requisitos legais e éticas em todo o Uso de Animais em Pesquisa e Ensino <ol><li> Todos os procedimentos cirúrgicos devem ser aprovados pela autoridade local ético ou legal (IACUC ou Comitê de Ética ou Home Office, etc.) </li><li> Certifique-se que esta aprovação está no lugar antes de começar. </li><li> Se houver qualquer dúvida de aprovação para a cirurgia ou a aprovação para o uso de animais, não prossiga. </li></ol> 2. Compreensão de uma técnica asséptica <ol><li> Esterilidade como um conceito <ol><li> O objetivo da técnica asséptica é reduzir ou eliminar sempre que possível a carga bacteriana normal presente no animal e no ambiente antes de iniciar a cirurgia. Isto significa que os instrumentos são esterilizados, a superfície de trabalho cirúrgico é desinfetada, eo animal e as mãos do cirurgião são desinfectados. </li><li> Cirurgia, realizada corretamente, não precisa de antibióticos profiláticos ou quaisquer outros tratamentos, que não seja o alívio da dor. </li><li> Mesmo com uma excelente técnica asséptica, bactérias provenientes do assunto cirúrgico pode ainda ser introduzido em uma ferida, criado cirurgicamente. Técnica asséptica apropriada limita o risco de introdução de agentes infecciosos, principalmente bactérias, em locais cirúrgicos. </li></ol></li><li> Campo estéril <ol><li> O campo estéril abrange a área cirúrgica, a área preparada para o animal, e à frente do cirurgião. </li></ol></li><li> Quebras de esterilidade <ol><li> Quebras de esterilidade ocorrer quando o cirurgião toca em algo fora do campo estéril. Este pode ser o rosto dela, uma luminária, uma área despreparados do animal, ou um instrumento não esterilizado. </li><li> Esta é a razão antibióticos profiláticos podem ser usados. </li><li> Lembre-se, uma atividade especial está acontecendo. Fique calmo, atencioso e preciso. </li></ol></li></ol> 3. Preparação para Cirurgia <ol><li> Cirurgia de roedores não requer um conjunto dedicado cirúrgico. Idealmente, as cirurgias devem ser realizadas em uma área separada dentro de um laboratório, como um capuz ou câmara de fluxo laminar. Independentemente disso, a área escolhida deve ser arrumado, bem iluminado, e fora do fluxo de tráfego. Cirurgias de roedores são muitas vezes realizados em uma bancada de laboratório. Antes de organizar a área cirúrgica, limpar a bancada bem com um desinfectante. </li><li> É útil para o cirurgião de ter um assistente. Este assistente pode ajudar com a anestesia, preparando os animais, e recuperação de monitoramento. Isso permite que o cirurgião para preparar-se enquanto os animais são preparados, encurtando assim o tempo do animal sob anestesia, e, talvez, permitindo cirurgias mais para ser realizada. </li><li> Organizar a área cirúrgica, para que existem três zonas distintas: preparação, cirurgia e recuperação. </li><li> Para a área de preparação, montar os suprimentos necessários: <ol><li> Pomada oftálmica lubrificante </li><li> Clippers ou navalha </li><li> Gaze </li><li> Cirúrgicos soluções matagal <ol><li> Soluções matagal cirúrgicos comumente utilizados são iodóforos ou clorexidina / </li><li> 70% de álcool isopropílico também é usado como parte do matagal cirúrgico. </li></ol></li></ol></li><li> Para a área cirúrgica, montar e organizar os materiais necessários. <ol><li> Fonte de calor para manter o roedor quentes <ol><li> A fonte de calor ideal é uma almofada de aquecimento de recirculação de água. Almofadas de aquecimento eléctrico não são aceitáveis ​​para a cirurgia. Luvas cirúrgicas cheia de água quente, ou aquecedores de mão química também podem ser usados. Se qualquer um dos dois últimos são usados, a temperatura do objeto devem ser cuidadosamente monitorizados durante a cirurgia. </li></ol></li><li> Plataforma cirúrgica <ol><li> Esta pode ser uma almofada estéril impermeável colocada sobre a fonte de calor. </li></ol></li><li> Material descartável <ol><li> Estas podem incluir: campos cirúrgicos estéreis, gaze, algodão aplicadores, fluidos para a administração para o roedor solução de irrigação, o tecido. </li></ol></li><li> Instrumentos esterilizados <ol><li> O complemento de instrumentos pode variar dependendo da cirurgia, mas geralmente incluem bisturis, afastadores de tecidos, fórceps, hemostats e tesoura. </li><li> Esterilizador de instrumento ou de esterilização solução se os mesmos instrumentos devem ser usados ​​em mais de um assunto cirúrgico <ol><li> O uso de um esterilizador quente talão para esterilizar instrumentos entre animais é comum. </li></ol></li></ol></li><li> Material para fechar a incisão cirúrgica. <ol><li> Os materiais utilizados dependerá do sítio cirúrgico e aplicação, mas podem incluir: sutura e agulhas, grampos e um aplicador de grampo, ou cola de tecido </li></ol></li><li> Qualquer outro equipamento especial necessário (aparelho estereotáxico, implantes, microscópio cirúrgico) </li></ol></li></ol> 4. Preparar os instrumentos de cirurgia <ol><li> Instrumentos devem estar limpos eestéril no início da cirurgia. Isso é muitas vezes feito através da criação de pacotes completos cirúrgicos que são autoclavados. </li><li> Instrumentos podem ser usados ​​para mais de uma cirurgia de roedores sem autoclave e reembalagem, mas devem ser limpos e esterilizados entre roedores. <ol><li> Se um esterilizador talão quente é usado, certifique-se de dar tempo para que os instrumentos para esfriar após a esterilização. Instrumentos podem ser arrefecidas por imersão em água estéril. </li><li> Esterilizantes químicos também podem ser usadas, mas requerem um maior tempo de contato (~ 10 minutos, poderia ser de 30-60 minutos, requerem limpeza). O álcool não é um esterilizante. </li></ol></li><li> Organizar instrumentos em drape impermeável estéril na ordem em que eles serão usados. </li></ol> 5. Preparar o animal para a cirurgia <ol><li> As três coisas que são administrados antes da cirurgia são a anestesia, analgesia, e antibióticos. <ol><li> A anestesia é necessário para a cirurgia. Anestésicos podem ser administrados por inalação ou injeção. <ol><li> Anestésicos inalantes mais comuns em uso atualmente isoflurano. </li><li> Mais comum injetável anestésico utilizado é uma combinação de ketamina e xilazina, possivelmente com outro acrescentou sedativo. </li><li> Consulte seu veterinário para a equipe do local doses adequadas. </li></ol></li><li> Preventiva analgésicos são recomendados e devem ser administradas antes da cirurgia começa. <ol><li> Comumente usados ​​não-esteróides anti-inflamatórios incluem flunixin e carprofeno. </li><li> Opióides disponíveis podem incluir buprenorfina, morfina ou fentanil. </li><li> Consulte seu veterinário para a equipe do local doses adequadas e vias de administração. </li></ol></li><li> Com a cirurgia realizada adequadamente, os antibióticos não são geralmente necessários, com exceção de algumas cirurgias de alto risco gastrointestinal. <ol><li> Se os antibióticos são usados, fornecer peri-operatório (antes da primeira incisão). </li><li> Consulte seu veterinário para a equipe do local antibióticos apropriados, dosagens e vias de administração. </li></ol></li></ol></li><li> Preparação cirúrgica do local da incisão <ol><li> Raspar o local da incisão. Geralmente raspar uma área de aproximadamente 3 vezes o tamanho da incisão proposta. O tamanho da área raspada e preparada pode ser limitado pelo tamanho do animal ou na área animal. </li><li> A área depilada é desinfectados com múltiplas aplicações de solução matagal cirúrgicas e álcool isopropílico. Aplicação é tipicamente matagal cirúrgica primeiro, depois o álcool. Terminar com uma aplicação final de solução matagal. </li><li> Esfregando cirúrgico é realizado em um padrão circular, começando no centro e em espiral para fora, ou em animais de pequeno porte, de forma unidirecional. <ol><li> Se esfregar unidirecionalmente, coloque gaze esterilizada na margem crainial da área raspada, cobrindo o cabelo do animal. Segure e estabilizar o animal delicadamente através da gaze estéril. Aplicar solução de álcool e esfregue unidirecionalmente longe da gaze estéril. </li></ol></li></ol></li><li> Mover o animal para a área cirúrgica <ol><li> Mover o animal com o local preparado cirúrgica para cima, e sem contato com o local preparado. </li><li> A posição do animal na área cirúrgica para o local da cirurgia é para cima, de frente para o cirurgião. </li></ol></li><li> Draping o animal <ol><li> Se o animal é coberto pelo assistente, o assistente deve se lembrar que a superfície exterior da cortina é considerado parte do campo estéril e não deve ser tratado pelo assistente. Draping é muitas vezes deixada para o cirurgião, e armar é incluído no pacote cirúrgico. </li><li> A cortina de papel padrão à prova de água disponível é geralmente recomendado. </li></ol></li></ol> 6. Preparar o cirurgião para a cirurgia <ol><li> Preparação do cirurgião deve enfatizar que uma atividade especial terá lugar, no qual o cirurgião deve estar ciente de todos os seus movimentos dentro e fora do campo estéril. </li><li> O cabelo eo rosto são geralmente cobertos por um gorro e máscara, respectivamente. Estes devem ser novo no início da sessão cirúrgica, mas não precisam ser alteradas entre os animais. </li><li> Cirurgiões devem usar um vestido cirúrgica descartável, jaleco descartável e limpa ou, pelo menos um jaleco limpo. Este não precisa ser alterada entre animais, mas deve ser alterado entre as sessões de cirurgia. </li><li> As mãos devem ser bem limpos antes da cirurgia. Luvas cirúrgicas e luvas de exame deve ser usado. Se as luvas de exame são utilizados, eles devem ser lavadas com desinfetante cirúrgico antes de ser usado. As luvas devem ser mudadas entre os animais. </li></ol> 7. Durante a cirurgia <ol><li> Manutenção do campo estéril. <ol><li> Uma vez que suas mãos são estéreis eo campo operacional é estéril, você terá que se mover com cuidado e lembre-se para não quebrar a esterilidade. Esta inclusãodes ter um campo estéril na qual você pode estabelecidos instrumentos, lembrando para não arranhar seu nariz, e só entregando o paciente cirúrgico através da cortina estéril. </li></ol></li><li> Manipulação de tecidos <ol><li> Lidar com tecidos delicadamente. Mantenha tecidos úmidos, especialmente se a cirurgia for prolongada. Minimizar a criação de bolsas de tecido e dissecção desnecessária. </li><li> Manuseio adequado dos tecidos reduz oportunidade e risco de infecções pós-operatório, a cura velocidades, e reduz a dor pós-operatória. </li></ol></li><li> Repor os líquidos perdidos <ol><li> As rotas usuais de administração de fluidos em roedores são subcutânea ou intraperitoneal. Use pequenas quantidades de animais por via intraperitoneal-1-2 ml para pequenos ratos, por exemplo. </li><li> Líquidos aquecidos podem ajudar a evitar uma queda na temperatura do corpo. Mouse e temperatura corporal de ratos é maior do que os seres humanos, de modo fluidos devem ser mais quentes. </li></ol></li><li> Manter o calor <ol><li> Colocação de uma almofada de aquecimento abaixo do animal durante a cirurgia e da gaiola durante a recuperação é uma maneira padrão para manter a temperatura corporal de um animal. <ol><li> Cuidado com almofadas de aquecimento de usar apenas aqueles que estão marcados para a cirurgia. Outros podem induzir lesão térmica. </li></ol></li><li> Líquidos aquecidos, por via intraperitoneal dado, também pode ajudar os animais quente. </li></ol></li><li> Operacional microscópio pode facilitar alguns procedimentos (cirurgia microvascular, os cirurgiões mais velhos, etc, podem também ser alcançados através do uso de lentes de aumento, como lupas, etc) </li></ol> 8. Pós-operatório Considerações sobre recuperação <ol><li> Animais deve se recuperar em uma cama de papel plana (toalhas de papel estéreis, etc) ao invés de cama criação padrão animal. </li><li> Manter o animal aquecido. Calor vai ajudar na recuperação rápida. Isso é muitas vezes acompanhada da colocação da gaiola de recuperação metade em uma almofada de aquecimento, para que os animais podem escolher a sua temperatura preferida como recuperar. </li><li> Não retornam animais ou gaiolas para a área de animais exploração até que todos os animais aparecem normal. Qualquer animal que teve a cirurgia deve ter recuperado a capacidade de direito próprio na gaiola e ser capaz de mover-se normalmente antes de ser devolvido para a área de exploração. </li><li> Monitorar os animais no pós-operatório para os sinais inesperados de doença ou infecção. Animais geralmente perdem uma pequena quantidade de peso após a cirurgia, mas com analgesia adequada e fornecimento de alimentos, eles devem recuperar o peso rapidamente. </li></ol> 9. Pós-operatório de monitoramento é a parte final da cirurgia bem sucedida <ol><li> Por cinco a sete dias após a cirurgia, monitorar a condição geral do animal. <ol><li> Pós-operatório, os animais devem ser brilhante, alerta e ativo. Eles devem estar interagindo normalmente com cagemates, comendo e bebendo, e capaz de atingir normais espécie-específicos posturas. </li><li> Animais que estão deprimidas, anorexígenos, ou lento deve ser examinado quanto à causa dessa mudança. Considere a possibilidade de dor não tratada ou infecção. </li></ol></li><li> Alimentos / hídrica também é importante para a recuperação. <ol><li> Haverá alguma queda no consumo após a cirurgia. Isto pode ser mitigado fazendo comida e água mais fácil acesso. <ol><li> Tubos mais sipper pode ser útil. </li><li> Fornecimento diário de comida molhada no fundo da gaiola também pode atrair animais para comer. </li></ol></li><li> Alguns analgésicos em ratos resultar em pica, então estar ciente de que os animais podem comer itens inadequados (como cama) a lesões. </li></ol></li><li> Monitor de animais para sinais de infecção na incisão. O período de perigo é os primeiros 7 dias e os animais devem ser verificadas diariamente. <ol><li> Sinais de infecção incluem vermelhidão, inchaço, secreção (purulenta ou serosa), dor, ou a abertura da incisão (deiscência). </li></ol></li></ol> 10. Após sua cirurgia for concluída, o passo final é avaliar o sucesso de sua cirurgia <ol><li> Foi o modelo induzido parte / removido / funcionalidade restaurado? </li><li> Estava lá como pequena dor possível? </li><li> Não houve infecção? </li><li> Sucesso! </li></ol>

<ol><li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22American+College+of+Laboratory+Animal+Medicine+Position+on+Rodent+Surgery%22">American College of Laboratory Animal Medicine Position on Rodent Surgery</a>. , Forthcoming.</li>
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<li>Popp, M. B., Brennan, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+vascular+access+in+the+rat%3A+importance+of+asepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Long-term vascular access in the rat: importance of asepsis.</a> Am J Physiol. 241, H606-H612 (1981).</li>
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</ol>

Todos os autores trabalham para Charles River, um grande fornecedor de animais cirurgicamente alterado para a pesquisa.

Cirurgia experimental em roedores raramente é realizada por veterinários ou médicos. Em vez disso, é freqüentemente realizada por pesquisadores da área biomédica com pouco ou nenhum treinamento formal nos princípios da cirurgia e técnica asséptica. Em um ambiente de pesquisa, a cirurgia é normalmente aprendemos com os colegas, se geralmente não formalmente treinados também. Cirurgia realizada no laboratório de pesquisa também pode ser visto principalmente como um método de preparação de um modelo animal com o objetivo de gerar um conjunto de animais para um estudo. Enquanto toda a cirurgia particular, é geralmente uma questão de coordenação olho-mão e habilidade técnica, sendo que ambos podem ser adquiridos através da prática, princípios e habilidades associadas com o conceito de técnica asséptica (e, portanto, a cirurgia sem infecção) não pode ser adquirido exclusivamente através da prática e muitas vezes não são plenamente transmitidas para os pesquisadores. A ausência de treinamento formal em princípios cirúrgicos podem levar a uma falta de compreensão do significado igual de ambos cirurgia tecnicamente correcta e cuidados pré e pós-operatória dos animais. Consideração de ambos a cirurgia em si e no cuidado peri-operatório de animais resultará em um aumento no bem-estar animal ea qualidade dos dados obtidos a partir do modelo cirúrgico. Por exemplo, a infecção pós-cirúrgica subclínicas podem confundir os resultados, como podem as mudanças no comportamento e fisiologia visto com dor. Como espécies de presas, a maioria dos roedores são surpreendentemente estóica e, embora sofrendo de dor pós-operatória ou infecção podem mostrar poucos sinais clínicos. Os sinais sutis de dor ou angústia em roedores são ainda mais obscurecido por uma falta geral de formação de pesquisadores biomédicos em reconhecimento desses sinais em roedores. Além disso, os roedores são mais ativos durante o ciclo escuro, quando o pessoal geralmente não estão disponíveis para ver os sinais clínicos e comportamentais de dor após a cirurgia. Este vídeo não substitui a formação cirúrgica adequada, que seria idealmente ambos os hands-on e é fornecido por sua instituição, mas é projetado para dar aos pesquisadores uma visão geral das preocupações comuns e demonstração visual da aceitas assepsia e técnicas necessárias para desenvolver uma competência mínima no desempenho da cirurgia de sobrevivência em roedores.

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Erratum: Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.

princípios de cirurgia de roedores para o cirurgião nova

Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon

Por razões de bem-estar tanto científico e animal, a formação em conceitos básicos e técnicas cirúrgicos devem ser realizados antes mesmo de tentar realizar a cirurgia em um roedor. Estudantes, pós-doutorado acadêmicos e outros interessados ​​em realizar a cirurgia em roedores como parte de um protocolo de pesquisa pode não ter tido treinamento cirúrgico formal como parte de seu curso exigido. Cirurgia em si é uma habilidade técnica, e que irá melhorar com a prática. Os princípios da técnica asséptica, no entanto, muitas vezes permanecem inexplicados ou ignorantes. Para a maioria dos novos cirurgiões, esta informação vital é apresentado em forma fragmentada ou aprendido no trabalho, nenhum dos quais é o ideal. Pode também tornar o aprendizado como realizar uma cirurgia em particular difícil, como o cirurgião está aprendendo novas tanto uma técnica cirúrgica e os princípios de assepsia, ao mesmo tempo. Este artigo resume e faz recomendações para habilidades básicas e técnicas cirúrgicos necessários para a cirurgia de roedores bem sucedida. Este artigo é projetado para complementar treinamento hands-on por instituição do usuário.

Antes de tentar a cirurgia, um cirurgião novo deve ter uma formação básica em técnicas cirúrgicas e conceitos. Este artigo apresenta considerações básicas cirúrgica com ênfase em roedores.

Princípios de Cirurgia de roedores para o Cirurgião Nova

Por razões científicas e de bem-estar animal, o treinamento em conceitos e técnicas cirúrgicas básicas deve ser realizado antes de se tentar executar...

O objetivo geral deste procedimento é delinear os princípios e práticas envolvidos na cirurgia asséptica em roedores. Isso é alcançado primeiramente introduzindo o conceito de campo estéril. Em seguida, demonstra-se a preparação correta da área de trabalho, que permitirá um fluxo de trabalho contínuo e a manutenção do campo estéril.Em seguida, são descritos os passos necessários para preparar o animal e o cirurgião, os quais minimizam a introdução de contaminantes ambientais e a dor no roedor. Por fim, são discutidas considerações cirúrgicas simples, como o manuseio dos tecidos e os cuidados pós-operatórios com o animal submetido à cirurgia. Geralmente, pesquisadores novos na cirurgia enfrentam dificuldades porque estão aprendendo simultaneamente a técnica asséptica e um procedimento cirúrgico tecnicamente exigente.A demonstração visual da técnica asséptica é importante porque, muitas vezes, essas habilidades são novas para indivíduos sem treinamento médico formal. Antes de iniciar qualquer procedimento cirúrgico, ele deve ser aprovado pela autoridade legal ou ética local. Isso pode incluir um comitê institucional de cuidado e uso de animais, um comitê de ética ou o escritório central.Este vídeo tem como objetivo servir de introdução ou complemento ao treinamento prático oferecido em sua instituição. O objetivo dos procedimentos cirúrgicos em roedores é a ausência de sepse ou infecção após a cirurgia. Para alcançar isso, as mãos do cirurgião devem ser desinfetadas, os instrumentos esterilizados e a área cirúrgica sanitizada.Embora se utilize uma excelente técnica asséptica, bactérias provenientes do paciente ainda podem ser introduzidas em uma ferida. A técnica asséptica adequada limita o risco de introdução de agentes infecciosos, principalmente bactérias, em feridas e locais cirúrgicos. O campo estéril engloba a área onde os instrumentos são dispostos e a área preparada no animal para a cirurgia.Um campo estéril é a área acima, abaixo e ao redor do animal que contém a parte frontal do cirurgião e todos os materiais e equipamentos necessários para a cirurgia. Se equipamentos, materiais ou o cirurgião saírem do campo estéril, o cirurgião deve parar imediatamente e corrigir a quebra da técnica para evitar o risco de infecção. Cirurgias em roedores não exigem salas cirúrgicas dedicadas, mas idealmente devem ser realizadas em uma cabine de segurança ou gabinete de fluxo laminar.A área deve ser organizada, bem iluminada e fora do fluxo de tráfego. Se as cirurgias forem realizadas sobre uma bancada de laboratório, esta deve ser bem limpa com um desinfetante. Antes de preparar a área cirúrgica, organize-a de modo que haja três zonas distintas.Preparação, cirurgia e recuperação para a área de preparo: reúna os materiais necessários, como pomada lubrificante oftálmica, tesouras, lâminas ou borracha, e soluções antissépticas para a área cirúrgica. Monte e organize os suprimentos necessários, como uma placa aquecedora com água recirculante para manter o roedor aquecido e uma placa estéril impermeável. Se forem realizadas cirurgias sucessivas em uma mesma sessão, um esterilizador de instrumentos, como um esterilizador por calor radiante, também deve estar disponível. Por fim, reúna os materiais necessários para fechar a incisão cirúrgica: suturas e agulhas, grampeador e grampos ou cola cirúrgica.Todo outro equipamento necessário, como aparelho estereotáxico, implantes ou microscópio cirúrgico, também deve ser organizado. A área de recuperação deve conter uma gaiola grande colocada sobre uma placa aquecida, que normalmente deve ser forrada com cama de papel liso no início da cirurgia. Todos os instrumentos devem estar limpos e estéreis.Isso é frequentemente realizado criando pacotes cirúrgicos completos que são autoclavados. Os instrumentos estereotáxicos devem ser bem limpos entre cirurgias e as peças que entram em contato com os animais, como as barras auriculares ou incisivas, ou que são manipuladas pelo cirurgião, como os botões, devem ser desinfetadas antes do uso e entre animais. Os botões podem ser cobertos com envoltório estéril para garantir a esterilidade durante a cirurgia.Os instrumentos podem ser usados em mais de uma cirurgia de roedor sem autoclavagem e reembalagem, mas devem ser limpos e esterilizados entre um roedor e outro, por exemplo, com uma conta quente. O esterilizador deve permitir tempo para que os instrumentos esfriem após a esterilização antes de entrarem em contato com o tecido. Novamente, os instrumentos podem ser resfriados mergulhando-os em água estéril; o álcool não é um esterilizante.Três tipos de medicamentos são normalmente administrados a roedores antes da cirurgia: anestésicos, analgésicos e antibióticos. A anestesia pode ser administrada como agente inalatório ou por injeção. O anestésico inalatório mais comum em uso em roedores é a isofluorina.Os anestésicos injetáveis comuns incluem cetamina e xilazina, com ou sem outro sedativo adicionado. Muitos anestésicos abolem o reflexo palpebral. Use sempre pomada oftálmica estéril para proteger os olhos antes de iniciar qualquer procedimento.Recomendam-se analgésicos preventivos, que incluem anti-inflamatórios não esteroides, como o flu nixon, e opioides, como a buprenorfina ou a morfina. Para preparar a área cirúrgica, primeiro retire os pelos com uma máquina de barbear. Os pelos podem introduzir contaminação na incisão cirúrgica; por isso, barbeie uma área maior do que a incisão prevista, com margens amplas.Por exemplo, para uma incisão de um centímetro, uma área de três centímetros é frequentemente preparada. Isso pode ser limitado pelo tamanho do animal ou pela região anatômica. Realize três aplicações alternadas de um antisséptico cirúrgico e álcool 70% ISA, em um padrão circular ou unidirecional, finalizando com uma aplicação da solução antisséptica, não do álcool.Em seguida, posicione o animal de modo que o local cirúrgico fique voltado para cima. O cirurgião finalmente realiza uma compressão dos dedos dos pés para verificar se o animal está profundamente anestesiado. A preparação do cirurgião deve enfatizar que uma atividade especial ocorrerá, na qual ele deverá estar atento a todos os seus movimentos dentro e fora do campo estéril. Os cabelos e o rosto são geralmente cobertos por uma touca e uma máscara, respectivamente.Estes devem ser novos no início da sessão cirúrgica, mas não precisam ser trocados entre os animais. As mãos devem ser bem higienizadas antes da cirurgia. Luvas cirúrgicas estéreis devem ser utilizadas para a cirurgia.As luvas devem ser trocadas entre animais ou se estiverem danificadas ou contaminadas durante um procedimento. Idealmente, os cirurgiões devem usar um avental cirúrgico descartável, mas um jaleco limpo, seja descartável ou recentemente lavado, é aceitável. O jaleco não precisa ser trocado entre animais, mas deve ser trocado entre sessões cirúrgicas.Para iniciar a cirurgia, cubra com um campo estéril impermeável. Monitore periodicamente os animais para verificar a oxigenação adequada e a profundidade anestésica. Se o monitoramento da profundidade anestésica exigir uma quebra de assepsia, essa tarefa deverá ser realizada por um auxiliar cirúrgico.Quebras na esterilidade devem ser corrigidas imediatamente. Quebras comuns nos procedimentos incluem coçar o rosto ou tocar objetos fora do campo estéril, como uma fonte de luz; as luvas devem ser trocadas imediatamente se houver qualquer falha na esterilidade. O suporte adicional ao animal deve incluir a administração intraperitoneal, subcutânea ou intravenosa de soluções quentes, estéreis e fisiologicamente balanceadas, como cloreto de sódio 0,9%, recuperando os animais em gaiolas aquecidas forradas com toalhas de papel ou outro tipo de cama de papel liso, e não com a cama padrão de manejo animal.A gaiola de recuperação pode ser colocada parcialmente sobre uma bolsa de aquecimento, permitindo que o animal se mova para uma área mais fria assim que recuperar a mobilidade. Retorne os animais pós-operatórios para o alojamento somente após eles conseguirem se movimentar normalmente dentro da gaiola após a cirurgia. Facilite o acesso a comida e água.Adiciona-se água ao alimento para amaciá-lo, facilitando a alimentação dos animais. Os animais devem ser monitorados quanto a sinais de dor e podem necessitar de analgesia pós-operatória. Além disso, deve-se monitorar as feridas cirúrgicas quanto a inflamação ou infecção.Os fechos da ferida devem ser removidos entre 10 e 14 dias após a cirurgia. Uma cirurgia bem-sucedida é aquela em que não há infecção. A dor é mínima, e o objetivo do pesquisador ao realizar a cirurgia é alcançado.Cirurgias específicas e seus objetivos variarão de laboratório para laboratório, mas a técnica asséptica é sempre indicada. Cirurgias e aprendizado de habilidades. Quanto mais cirurgias você realizar, maior será sua confiança e sucesso na manutenção da técnica asséptica.Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma ideia de como os princípios da técnica asséptica se aplicam à cirurgia em roedores. Cada cirurgia terá suas próprias necessidades técnicas específicas, mas os princípios da assepsia são sempre aplicáveis.

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Biologia

Cirurgia estereotáxica em roedores permite a administração alvo de drogas ou estimulação elétrica e gravações em despertos, comportando-se animais. Neste vídeo de apresentação iremos demonstrar recentes refinamentos processuais para este procedimento de longa data que a taxa de sobrevivência melhorou com sucesso e perda de peso reduzido pós-cirúrgico.

Cirurgia estereotáxica de roedores e animais Melhorias Resultado do Bem-Estar de Neurociência Comportamental

Este protocolo demonstra a injeção de um vetor viral retrogradely transportável em tecido de medula espinhal de ratos. O vetor é tomado no sinapse e transportado para o corpo celular dos neurônios do alvo. Este modelo é apropriado para rastreamento retrógrado de importantes vias da coluna vertebral ou células alvos para aplicações da terapia de gene.

Injeção direta de um vetor de Lentivirus destaca várias vias motoras na medula espinhal de ratos

Este protocolo descreve uma abordagem reprodutível para a cirurgia do nervo facial no modelo de rato, incluindo descrições de vários padrões induziveis de lesão.

Cirurgia do nervo facial no modelo de rato para estudar inibição e regeneração axonal

Descrito aqui é um procedimento estereotático que pode atingir regiões cerebrais desafiadoras e de difícil acesso (devido a limitações espaciais) usando uma abordagem coronal angular. Este protocolo é adaptável tanto aos modelos de camundongos quanto a ratos e pode ser aplicado a diversas aplicações neurocientíficas, incluindo implantação de cânulas e microinjeções de construções virais.

Abordagem estereotática angular adaptável para técnicas versáteis de neurociência

Até o momento, o desenvolvimento de métodos de identificação da glândula paratireoide (PG) é limitado pela falta de modelos animais na pesquisa pré-clínica. Aqui, estabelecemos um modelo de rato simples e eficaz para imagens de PG intraoperatórias e avaliamos sua eficácia usando nanopartículas de óxido de ferro como um novo agente de contraste PG.

Estabelecimento de um Modelo de Rato Simples e Eficaz para Imagem Intraoperatória da Glândula Paratireoide

O reparo da artéria intracarótida em um modelo de camundongo após a injeção retorna o fluxo sanguíneo para a artéria sem afetar negativamente a distribuição do material injetado. O reparo no local da injeção facilita as injeções subsequentes através da mesma artéria e previne a isquemia cerebral em cepas de camundongos que não possuem um Círculo de Willis completo.

Facilitando injeções intracarotídeas repetidas em modelos de camundongos por uma nova técnica de reparo no local da injeção

Este manuscrito apresenta um protocolo padronizado para uma nefrectomia 5/6 por bipolectomia aguda via laparotomia mediana em modelo de rato, com o objetivo de induzir um estado de insuficiência renal via redução do parênquima renal com grande grau de precisão metódica e baixo risco de erro técnico.

Nefrectomia 5/6 usando bipolectomia afiada via laparotomia de linha média em ratos

Aqui, apresentamos dois protocolos para registro de microeletrocorticografia de alta densidade (μEcoG) em ratos e camundongos, incluindo métodos cirúrgicos, de implantação e de registro. As gravações de μECoG são realizadas em combinação com a gravação de politrodo laminar no córtex auditivo de ratos ou com a manipulação optogenética da atividade neural no córtex somatossensorial de camundongos.

Investigações Multiescala de Processamento Cortical Integrando Politrodos Laminares e Optogenética com Microeletrocorticografia em Roedores

O advento da tecnologia local específico recombinase (SSR) eo sistema Cre / lox tem levado a inúmeros avanços em biologia molecular, e provou-se como uma valiosa ferramenta para avaliar a função do gene em animais transgênicos. Esta entrevista aborda o mecanismo de recombinação sítio específica por Ciclização recombinase (CRE) e como o uso desta enzima tem levado ao desenvolvimento de mutagênese condicional, que tem vantagens significativas sobre os tradicionais knock out estratégias.

Princípios do site-specific Recombinase (SSR) Tecnologia

Suportados bicamadas planar são ferramentas poderosas que podem ser usados ​​para modelar as interações moleculares em uma sinapse imunológica. Aqui, vamos mostrar os métodos de ancoragem de proteínas de adesão celular que modula a formação de sinapses para o folheto superior do bilyer lipídico e visualize a formação de sinapses através de microscopia TIRF.

Suportados Bicamadas Planar para a Formação do Estudo da Sinapses imunológicas e Kinapse

Aprenda os princípios de cirurgia asséptica em roedores, incluindo preparação do campo estéril, anestesia e cuidados pós-operatórios. Este método essencial capacita novos cirurgiões a minimizar infecções e garantir o bem-estar animal.

Princípios de Cirurgia de roedores para o Cirurgião Nova

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