Barnes Maze: um método para avaliar o aprendizado espacial e a memória em animais de laboratório

O Barnes Maze é uma plataforma circular com orifícios igualmente espaçados em torno de sua borda e uma caixa de fuga sob um orifício alvo. Animais de laboratório navegam pelo labirinto para encontrar o buraco alvo e escapar de estímulos inatamente aversivos, como espaços abertos e luzes brilhantes.

Para começar, coloque o assunto, por exemplo, um rato, no centro do labirinto sob uma câmara escura. Em seguida, levante a câmara e solte o animal na arena. Para motivar o sujeito a entrar efetivamente no orifício alvo, use um estímulo levemente aversivo, como som ultrassônico.

O teste termina quando o mouse entra no orifício alvo ou um tempo predefinido tem decorrido. O aprendizado espacial e a memória são medidos durante cada tentativa, registrando o número de buracos que o sujeito explorou e o tempo que levou para concluir a tentativa, além de mapear o caminho do animal e a navegação espacial.

Antes de iniciar o procedimento de teste do Barnes Maze, limpe todos os componentes do labirinto com água e etanol 70%. Quando os componentes estiverem secos, monte o labirinto e atribua aleatoriamente cada mouse a um orifício alvo para usar durante todo o período de teste.

Os buracos podem ser rotulados de 1 a 20 na parte inferior do labirinto ou do lado de fora do perímetro do labirinto, onde não são visíveis de dentro do labirinto. Para iniciar um teste de treinamento, substitua o disco de orifício atribuído por uma caixa preta de 23 por 11 centímetros e use elásticos e ganchos para prender firmemente a caixa ao labirinto.

Em seguida, coloque um mouse no centro do Barnes Maze embaixo de um copo e deixe o mouse se aclimatar por 30 segundos. No final do período de aclimatação, inicie a gravação do vídeo e ligue a luz e o gerador de ruído ultrassônico.

Levante o copo por meio de um mecanismo de corda para evitar polarizar o rumo inicial do animal e inicie um cronômetro atrás de uma cortina de observação. Acompanhe os movimentos do animal em um pedaço de papel com um diagrama do labirinto e use o diagrama para analisar as estratégias de busca do mouse, bem como para determinar o número de buracos que foram explorados no quadrante oposto ao alvo.

Quando o mouse entrar no orifício alvo, cubra o orifício com um aglutinante opaco pesado e desligue o gerador de ruído ultrassônico. Se o rato não tiver entrado no alvo após 5 minutos, encurrale o animal no buraco do alvo. Em seguida, deixe o mouse permanecer na caixa de destino por 1 minuto sem ser perturbado, certificando-se de desligar o ruído ultrassônico. Em seguida, devolva o animal à sua gaiola.

Quando todos os mouses tiverem sido testados, revise manualmente sua gravação para rastrear o movimento geral do mouse para determinar o número de buracos incorretos explorados antes e depois que o alvo for encontrado, bem como o número de buracos do buraco alvo até o primeiro buraco explorado e qualquer comportamento de limpeza notável.