Perfusão hepática murina in vivo: um método para infundir o fígado de roedor com solução através da veia porta

Depois de anestesiar e preparar o roedor, localize a veia porta e deslize um fio sob ela. Dê um nó solto ao redor da veia porta sem esticá-la. Isso estabilizará um cateter intravenoso mais tarde durante o protocolo.

Segurando a agulha de um cateter IV chanfrado e paralelo à veia porta, insira-o no lúmen - o espaço dentro da veia. Retraia a agulha e empurre o cateter através da veia até a área venosa ramificada dentro do fígado.

Depois de estabilizar o cateter, aumente a taxa de bomba peristáltica. Imediatamente, o fígado deve empalidecer à medida que o sangue é substituído por líquido de perfusão. Corte um vaso sanguíneo importante para drenar ainda mais sangue e líquido de perfusão do fígado.

Aperte o vaso cortado algumas vezes para inflar o fígado e garantir que ele esteja completamente desprovido de sangue. Troque a bomba para que ela perfunda o tampão no fígado. Finalmente, repita a insuflação do fígado brevemente, tomando cuidado para não estourar o fígado de seu tecido conjuntivo.

Para colocar o cateter da veia porta, primeiro, use a parte de trás de uma pinça para mover os intestinos para o lado direito da cavidade abdominal do camundongo, expondo a veia porta, e use uma pin