Ecocardiografia de camundongos: uma técnica não invasiva para avaliar a morfologia cardíaca

0 visualizações5:51 min. • April 30th, 2023

Primeiro, aplique gel de ecocardiografia no transdutor de ultrassom e no tórax raspado de um camundongo anestesiado preso a uma placa de aquecimento. Coloque o transdutor à esquerda do esterno, voltado para o lado direito do pescoço, para obter uma visão através do coração chamada visão paraesternal de eixo longo.

Gire o transdutor 90 graus no sentido horário para a visualização do eixo curto paraesternal. Usando essa visualização, grave imagens no modo M para capturar o movimento do coração ao longo do tempo enquanto ele bate. Para medir as dimensões do ventrículo esquerdo, identifique quatro interfaces tecido-fluido de referência nas imagens registradas.

Estas são a interface entre a cavidade ventricular direita e a parede anterior do ventrículo esquerdo; entre esta parede e a cavidade ventricular esquerda; entre esta cavidade e a parede posterior do ventrículo esquerdo; e entre esta parede e o pericárdio.

Em seguida, calcule as distâncias entre essas quatro interfaces. Repita as mesmas medições quando o coração estiver em diástole, ou relaxado, e quando estiver em sístole, ou contraído.

Para começar, enquanto segura levemente um rato pela cauda, use uma balança de laboratório padrão para determinar o peso corporal do animal. Depois de anestesiar o mouse de acordo com o protocolo de texto, aperte levemente o pé traseiro e observe se a perna se retrai. Use um barbeador comercial para roedores para raspar o lado esquerdo do tórax e a axila esquerda.

Posicione o animal em uma almofada quente ajustada a 40 a 42 graus Celsius em uma posição rasa do lado esquerdo, com a cabeça às 12 horas e a cauda às 6 horas. Em seguida, use fita adesiva para fixar o braço esquerdo, a perna esquerda e a cauda. Aplique gel de ecocardiografia pré-aquecido no tórax raspado e na cabeça do transdutor.

Em seguida, coloque o transdutor ecocardiográfico paraesternal esquerdo, direcionando-o para o lado direito do pescoço para obter uma visão bidimensional do eixo longo paraesternal ao nível do músculo papilar. Em seguida, gire o transdutor 90 graus no sentido horário para obter uma visão de eixo curto. Estabeleça uma configuração de profundidade mínima e um zoom para maximizar a qualidade da imagem e a taxa de quadros. Defina a velocidade de varredura para o máximo. Grave imagens no modo M guiadas por 2D na visualização de eixo curto. Grave pelo menos 3 séries de 3 loops de cine de batimentos cardíacos para cada animal.

Depois de obter gravações bem-sucedidas, remova a fita dos membros e da cauda. Limpe o gel de ecocardiografia do tórax do camundongo, da almofada de aquecimento e do transdutor. Deixe o mouse sob observação na almofada de aquecimento, coberta com lenço de papel para evitar exposição desnecessária à luz e perda de calor até que ele acorde. Em seguida, coloque o animal de volta na gaiola.

Analise imagens gravadas no modo M a partir da visualização de eixo curto para determinar as dimensões e a função do ventrículo esquerdo ou do VE. Usando a identificação da interface tecido-sangue nas imagens armazenadas, medir a espessura da parede anterior do VE na sístole e diástole, os diâmetros sistólico e diastólico final interno do VE e a espessura da parede posterior do VE na sístole e diástole. Meça as dimensões diastólicas no momento das dimensões diastólicas máximas aparentes do VE e as dimensões sistólicas finais do VE no final da excursão sistólica mais anterior da parede posterior do VE. Toque na tela sensível ao toque no ícone "Analisar" e, em seguida, no ícone "LVAWd". Posicione o paquímetro eletrônico na interface entre a cavidade ventricular direita e a parede anterior do VE na diástole.

Em seguida, posicione o paquímetro eletrônico na interface entre a parede anterior do VE e a cavidade do VE para obter a espessura da parede anterior diastólica do VE. Posicione o paquímetro na interface entre a cavidade do VE e a parede posterior do VE para obter o diâmetro interno e diastólico do VE. Posicione o paquímetro na interface entre a parede posterior do VE e o pericárdio para obter a espessura da parede posterior diastólica do VE.

Para dimensões sistólicas do VE, toque na tela sensível ao toque no ícone "VDVEs" e posicione o paquímetro eletrônico na interface entre a cavidade ventricular direita e a parede anterior do VE na sístole. Posicione o paquímetro eletrônico na interface entre a parede anterior do VE e a cavidade do VE para obter a espessura da parede anterior sistólica do VE. Posicione o paquímetro na interface entre a cavidade do VE e a parede posterior do VE para obter o diâmetro interno e sistólico do VE. Posicione o paquímetro na interface entre a parede posterior do VE e o pericárdio para obter a espessura da parede posterior sistólica do VE.