Sistema de Cultura Proximal: Uma Técnica de Cultura In Vitro para Estudar a Sinalização Parácrina entre Células

Na sinalização parácrina, as células produzem e secretam moléculas de sinalização que induzem respostas nas células vizinhas. Para imitar a sinalização parácrina, comece preparando suspensões unicelulares de células cancerígenas de ovário e células mesoteliais em seu meio apropriado.

Em seguida, pegue uma inserção membranosa porosa invertida em uma placa de cultura estéril. Pipete a suspensão de células cancerígenas na superfície inferior da membrana de inserção para formar uma cúpula líquida. Incube para permitir que as células se estabeleçam e se fixem à membrana.

Inverta o inserto para drenar a mídia. Transfira o inserto para uma placa de cultura fresca contendo meio de crescimento para nutrir as células cancerígenas aderidas à superfície inferior da membrana. Agora, adicione a suspensão de células mesoteliais no poço de inserção. Incubar para permitir que as células adiram ao lado oposto da membrana, negando qualquer contato direto entre os dois tipos de células.

Durante a cultura, ambos os tipos de células secretam fatores de sinalização. Essas moléculas se difundem através da membrana porosa em direção às células vizinhas. Eles se ligam a receptores celulares específicos e in