Injeção intraperitoneal de células: um método de entrega de células cancerígenas no tecido adiposo peritoneal de modelo murino

A cavidade peritoneal é o espaço entre a parede abdominal e o revestimento dos órgãos internos. Para injeção intraperitoneal, comece prendendo um camundongo vivo pela região do pescoço, de modo que a cabeça do camundongo se incline para baixo com o abdômen ventral exposto.

Conter o mouse restringe seu movimento e desloca os órgãos abdominais em direção ao diafragma, evitando danos acidentais aos órgãos durante a inserção da agulha.

Adjacente à linha média do abdômen do camundongo, no quadrante inferior direito, localize um ponto para inserção da agulha. Este local evita o risco de perfurar o ceco.

Em seguida, pegue uma seringa contendo uma suspensão de célula única de células cancerígenas do ovário. Insira a agulha no ponto escolhido a uma profundidade de aproximadamente meio centímetro para penetrar apenas na parede abdominal externa. Finalmente, injete a suspensão de células cancerígenas lentamente. Isso garante uma distribuição eficiente das células dentro da cavidade peritoneal.

Retorne o camundongo à gaiola e monitore-o quanto ao crescimento do tumor. Os tecidos dentro da cavidade peritoneal podem liberar moléculas quimiotáticas específicas que atraem as células cancerígenas, levando à sua migração e colonização, contribuindo para o desenvolvimento do tumor.

Coloque 500 microlitros da suspensão de célula única marcada com fluorescência na seringa. Em seguida, coloque a seringa em uma agulha estéril de calibre 25 para reduzir o cisalhamento celular antes da injeção. Segurando o mouse com a outra mão, pegue o mouse pela nuca e segure a cauda usando a palma da mão e o indicador. Em seguida, fixe a perna traseira esquerda entre o dedo anelar e o dedo mínimo. Para evitar traumatizar os órgãos abdominais, prenda bem o camundongo para que ele não possa se mover durante a injeção.

Imagine uma linha no abdômen e localize um ponto no lado direito do animal e próximo à linha média. O ponto de entrada é cranial e ligeiramente medial do último mamilo. Prepare-se para inserir a agulha no lado direito do camundongo para evitar o ceco e reduzir o risco de perfurar os intestinos. Insira a agulha na região lateral inferior do abdômen do mouse a uma profundidade de aproximadamente 0,5 centímetros. Puxe o êmbolo para trás para confirmar que a agulha não penetrou em um vaso sanguíneo ou outros órgãos peritoneais.

Se nenhum fluido for aspirado, injete a amostra usando pressão lenta e constante. Em seguida, retire a agulha e devolva o mouse à sua gaiola. Não recape a seringa antes de descartá-la no recipiente para objetos cortantes.