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O tecido adiposo ou os depósitos de gordura presentes principalmente nas regiões omental, mesentérica, uterina, gonadal e esplenoportal do peritônio podem fornecer um microambiente adequado para a colonização de células cancerígenas durante a metástase.
Para isolar esses depósitos de gordura peritoneal, comece pegando um camundongo fêmea sacrificado. Faça uma incisão cirúrgica na linha média através da parede peritoneal para expor seus órgãos internos. Agora, localize a gordura omental presente sobre o estômago e o complexo do baço pancreático e extraia-a. Extirpe a gordura gonadal ao redor dos ovários. Além disso, remova a gordura uterina que envolve os chifres uterinos. Posteriormente, corte a junção entre o intestino delgado e o piloro para liberar a gordura mesentérica aderida ao intestino. Finalmente, extraia a fina faixa de gordura esplenoportal que conecta a extremidade distal do baço com o pâncreas.
Manter os tecidos adiposos dissecados num tampão refrigerado adequado para preservar a fisiologia dos tecidos. Analise esses tecidos adiposos peritoneais para avaliar a presença de células cancerígenas metastáticas colonizadas.
Como a coleta de depósitos de gordura peritoneal constitui a remoção de órgãos internos, faça uma incisão na linha média perto das papilas inguinais através da parede peritoneal para expor os órgãos internos. Para extirpar a gordura omental, exponha o complexo pancreático omental estendendo o baço da cavidade peritoneal com uma pinça.
Para a gordura gonadal, use uma pinça para levantar a gordura gonadal ao redor dos ovários e excise-a cortando as conexões dos tecidos. Coloque imediatamente os lenços em PBS gelado. Em seguida, remova a gordura uterina usando uma pinça para levantar a gordura uterina ao redor dos cornos uterinos e excise cortando as conexões dos tecidos antes de colocar imediatamente os tecidos em PBS gelado.
Ao obter a gordura mesentérica, corte a junção entre o intestino delgado e o piloro. Use uma pinça para segurar firmemente a extremidade livre do intestino delgado e retire-a lentamente da gordura mesentérica. Libere a gordura mesentérica da raiz mesentérica usando uma tesoura de dissecação. Em seguida, coloque imediatamente os lenços em PBS gelado.
Finalmente, para remover a gordura esplenoportal, levante a extremidade distal do baço usando uma pinça para expor a fina faixa de tecido adiposo que conecta o hilo do baço ao pâncreas. Extirpar a gordura esplenoportal, liberando-a primeiro do pâncreas e depois dissecando-a cuidadosamente do baço. Em seguida, coloque imediatamente os lenços em PBS.
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