Ensaio de depuração mesotelial: uma técnica in vitro para quantificar a capacidade de invasão de esferoides de câncer de ovário em monocamadas de células mesoteliais

0 visualizações • 4:34 min. • April 30th, 2023

Durante a metástase do câncer de ovário, as células malignas se desprendem do local do tumor primário e começam a circular dentro da cavidade peritoneal. Essas células podem então formar aglomerados ou esferóides que aderem à monocamada de células mesoteliais que reveste a cavidade peritoneal. À medida que o tumor cresce, ele limpa as células mesoteliais subjacentes para facilitar a invasão.

Para modelar a depuração mesotelial, comece semeando células mesoteliais que expressam proteína fluorescente verde ou GFP em uma placa de cultura com fundo de vidro revestida com fibronectina. O revestimento de fibronectina fornece uma matriz que promove a fixação celular. Incube o prato para permitir que as células mesoteliais se espalhem e formem uma monocamada.

Em seguida, transfira uma suspensão de esferóides de células cancerígenas de ovário expressando proteína fluorescente vermelha para a monocamada mesotelial. Visualize a cultura por um período prolongado usando microscopia de fluorescência de lapso de tempo. Os esferóides vermelho-fluorescentes se estabelecerão e se ligarão à monocamada mesotelial verde-fluorescente.

As células cancerígenas exercem força sobre as células mesoteliais, i

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