Modelagem de câncer baseada em membrana corioalantóide de frango: um modelo in ovo para estudar tumorigênese e metástase de células cancerígenas

A membrana corioalantóide de galinha, ou CAM, é uma membrana altamente vascularizada encontrada nos ovos de certos vertebrados, como galinhas. Esta membrana extra-embrionária reveste uma membrana de concha não vascular e funciona como o local de troca de oxigênio gasoso e dióxido de carbono entre o embrião e o meio ambiente.

Para gerar um modelo de câncer CAM, comece com um ovo de galinha fertilizado viável com um CAM totalmente desenvolvido com uma casca parcialmente aberta que expõe sua vasculatura ramificada. Confirme se o CAM está separado da membrana do invólucro.

Coloque um anel antiaderente estéril sobre um ponto de ramificação do vaso sanguíneo. Usando uma haste de vidro, esfregue suavemente a membrana dentro do anel para raspar sua camada epitelial externa e expor a camada mesodérmica subjacente que carrega a vasculatura. Pipet uma suspensão gelada de células cancerígenas misturadas com uma matriz extracelular adequada no anel. O anel restringe a dispersão celular.

Permita que a matriz se solidifique para proteger as células internas. Sele a abertura da casca do ovo e incube o ovo nas condições apropriadas. A vasculatura densa dentro da camada mesodérmica fornece oxigênio