Caracterização da Quimiorresistência Funcional: Um Método para Avaliar a Resistência a Drogas em Células Cancerígenas Usando Ensaio Clonogênico

Para avaliar a quimiorresistência em células cancerígenas, comece tomando uma placa de vários poços. Semeie uma suspensão das células de câncer de próstata sensíveis a medicamentos desejadas em alguns poços e uma suspensão da variante resistente a medicamentos das células nos poços restantes.

Incube a cultura para facilitar a fixação das células à placa de cultura. Trate ambos os tipos de células com uma variedade de doses crescentes da solução medicamentosa selecionada. As moléculas da droga entram nas células sensíveis e causam a morte celular mesmo em suas concentrações mais baixas. No entanto, as células resistentes expelem as moléculas do medicamento por meio de bombas especializadas de efluxo de medicamentos, permitindo sua sobrevivência apesar de serem expostas a concentrações mais altas de medicamentos.

Aspire o meio gasto contendo detritos e solução do medicamento. Suplemento com meios de crescimento frescos e sem drogas. Incubar para permitir que as células resistentes a medicamentos sobreviventes proliferem e formem colônias. Adicione uma solução de coloração adequada para colorir as colônias de células vivas.

Lave a cultura para remover o excesso de corante. Conte o núm