Macrodissecção de tecido tumoral FFPE: uma técnica para obter tecido tumoral específico de amostras não coradas

Para iniciar a macrodissecção, pegue uma lâmina de vidro carregando uma amostra de tecido. Além disso, pegue uma lâmina de referência com a mesma amostra de tecido e comode-a usando hematoxilina e eosina para coloração de H & E.

Em células normais, a hematoxilina confere uma coloração azul aos ácidos nucléicos, enquanto a contracoloração de eosina mostra as proteínas celulares rosa. A coloração azul profunda do núcleo ajuda a diferenciar as células cancerígenas das células normais.

Sobreponha a lâmina corada com H&E com a lâmina não corada para alinhar as amostras de tecido. Localize a porção que contém células tumorais na lâmina corada com H&E. Marque a área correspondente no slide não manchado.

Raspe o tecido desejado da lâmina não corada. Usando uma ponta de pipeta úmida, colete o tecido raspado para garantir uma fácil transferência da amostra de tecido. Transfira o tecido para um tubo contendo um tampão de lise. Os componentes do tampão de lise digerem o tecido, liberando os constituintes da célula.

Tratar o lisado com uma protease adequada e incubar a uma temperatura elevada. A protease cliva as DNases contaminantes, protegendo assim o DNA da degradação. Armazene o DNA contend