Criopreservação baseada em vitrificação: uma técnica de resfriamento ultrarrápido para preservar espécimes biológicos em temperaturas muito baixas para armazenamento de longo prazo

A vitrificação, uma técnica de criopreservação ultrarrápida, permite que células e tecidos vivos sejam resfriados e armazenados em temperaturas extremamente baixas por períodos muito longos.

Para vitrificar um tecido tumoral recém-colhido, primeiro coloque o tecido em uma placa de cultura. Extirpar quaisquer regiões necróticas, regiões contendo gordura ou coágulos sanguíneos do tumor. Lave o lenço para remover quaisquer vestígios de sangue.

Corte o tecido em fatias de espessura apropriada. Agora, transfira as fatias para um tubo contendo uma solução de vitrificação constituindo DMSO, ou dimetilsulfóxido, e sacarose. Esses constituintes atuam como crioprotetores para proteger as células contra danos causados pelo congelamento.

Incubar a baixa temperatura. O DMSO, um crioprotetor que permeia as células, difunde-se através da membrana celular e substitui a água nas células para evitar a formação de cristais de gelo intracelulares. Ao mesmo tempo, a sacarose, um crioprotetor não permeante, atua extracelularmente, facilitando a desidratação celular e reduzindo a formação de cristais de gelo intracelulares para mitigar o risco de morte celular.

Coloque as fatias de tumor equilibradas em