Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 3:05 min. • April 30th, 2023
Durante condições patológicas como o câncer, os neutrófilos ativados liberam armadilhas extracelulares de neutrófilos ou NETs - uma rede de fibras de DNA extracelular associadas a histonas e enzimas proteolíticas. Essas estruturas aprisionam as células cancerígenas e desempenham um papel fundamental na metástase do câncer.
Para estudar o comportamento pós-adesão de células cancerígenas aprisionadas em TNEs in vitro, primeiro, cultive neutrófilos de baixa densidade - uma subpopulação de neutrófilos - em uma placa de cultura revestida com polímero que facilita a fixação celular. Incubar para ativar os neutrófilos para liberar NETs semelhantes a malhas.
Em seguida, adicione um corante nuclear fluorescente verde impermeável à membrana para corar as fibras de DNA em NETs especificamente. Remova o meio gasto. Adicione uma suspensão de células cancerígenas à cultura de neutrófilos.
Incube a cultura por um curto período para facilitar a interação célula cancerígena-NET. O componente de DNA dos TNEs funciona como um fator quimiotático que estimula a migração de células cancerígenas e auxilia em sua adesão aos TNEs.
Remova o meio gasto. Enxágue suavemente a cultura com meios frescos apropria
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