JoVE Encyclopedia of Experiments
Pesquisa sobre o Câncer
0 vistas • 3:40 min • April 30th, 2023
Para começar, prepare um camundongo sacrificado na posição supina. Prenda um de seus pés para estender o membro verticalmente. Segure suavemente a pele do membro inferior.
Em seguida, remova cirurgicamente a pele e a fáscia, a camada de tecido conjuntivo frouxo logo abaixo da pele, expondo os ventres musculares subjacentes do membro inferior.
Identifique o músculo gastrocnêmio - um músculo grande e superficial de duas cabeças - no membro inferior posterior. Origina-se dos côndilos lateral e medial do fêmur posterior e se liga ao calcâneo - osso do calcanhar - através do tendão do calcâneo.
Segure a extremidade distal do músculo e puxe o ventre muscular em direção à sua origem. Extirpar o tendão do calcâneo gastrocnêmio seguido do músculo na origem mais próxima do fêmur.
Agora, localize o músculo tibial anterior. O músculo se origina da superfície anterolateral da tíbia e se liga ao osso cuneiforme medial através do tendão distal.
Separe o ventre do músculo tibial do tecido conjuntivo subjacente. Corte o tendão distal e o músculo na origem mais próxima da tíbia.
Finalmente, transfira os músculos excisados para criotubos. Armazene os tubos em baixas temperaturas até uma análise posterior a jusante.
Para evitar a contaminação da pele, borrife etanol 70% em todo o corpo. Em seguida, coloque o animal em um leito de dissecção em decúbito dorsal e prenda um membro posterior a uma pinça de bureta elevada para estender o membro verticalmente. Usando uma pinça Dumont, segure a pele superficial do membro posterior e use uma tesoura fina curva para remover suavemente a pele e a fáscia, expondo os ventres musculares subjacentes do membro inferior.
Identifique o músculo gastrocnêmio no membro inferior posterior por sua origem nos côndilos lateral e medial no fêmur posterior e sua inserção no calcâneo através do tendão do calcâneo. Use a pinça para agarrar a extremidade distal do gastrocnêmio e puxe o ventre muscular em direção à sua origem. Em seguida, use uma tesoura para cortar o músculo na origem o mais próximo possível do fêmur e transfira o músculo para um prato pré-pesado.
Pese o prato imediatamente e transfira o músculo para um criotubo pré-rotulado. Em seguida, identifique o músculo tibial anterior desde sua origem na superfície anterolateral da tíbia e sua inserção no cuneiforme medial através de seu tendão distal. Em seguida, segure o pé pelos dedos com o dedo indicador e o polegar e insira a ponta da pinça de Dumont imediatamente sob o tendão distal superficial do tibial.
Mova a pinça de forma que o lado rombudo possa ser usado para separar o ventre do músculo tibial do tecido conjuntivo subjacente e use a tesoura curva fina para cortar o tendão distal. Em seguida, corte o músculo na origem o mais próximo possível da tíbia.
Este artigo descreve um procedimento cirúrgico para isolar os músculos gastrocnêmio e tibial anterior de um camundongo eutanasiado. O método inclui etapas detalhadas para identificação, excisão e preservação dos músculos para análises posteriores.
O isolamento preciso do tecido muscular esquelético permite análises bioquímicas e histológicas confiáveis em estudos pré-clínicos. Este procedimento auxilia na validação de alvos ao fornecer amostras de tecido de alta integridade para a desmistificação mecanicista de vias relacionadas ao músculo. Técnicas reprodutíveis de excisão aumentam a prontidão dos ensaios e a consistência dos dados em fluxos de trabalho de descoberta.
Este método se insere no continuum de descoberta, desde a identificação do alvo até a validação pré-clínica, ao permitir a obtenção confiável de tecidos para ensaios funcionais.
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Última atualização: 22 agosto 2026