Preparação de montagem inteira do intestino de camundongo: usando um dispositivo simples de incisão intestinal para preparar a montagem inteira

A análise de montagem total permite a visualização de seções transversais de tecido multidimensional, preservando as interações estruturais entre as células e seu microambiente.

Para preparar montagens inteiras do intestino, comece com um intestino de camundongo recém-colhido. Remova o mesentério - dobras de tecido peritoneal - do intestino. Lave o intestino com um tampão resfriado para remover qualquer matéria fecal.

Em seguida, extirpe o ceco. Disseque o intestino em segmentos iguais. Faça pequenas incisões nos segmentos intestinais para drenar o fluido dentro deles.

Insira suavemente uma haste de aço inoxidável úmida nos segmentos intestinais. Agora, posicione essas hastes em ranhuras de retenção na base do dispositivo de incisão intestinal personalizado. Coloque a tampa do dispositivo sobre sua base.

Usando barras angulares na pálpebra como guia, incisão longitudinal dos segmentos intestinais. Remova a tampa do dispositivo. Umedeça os segmentos. Role suavemente a haste para o lado para liberar e espalhar os segmentos.

Mergulhe os segmentos em um banho contendo um fixador adequado e incube pela duração desejada. O fixador preserva quimicamente a estrutura celular e a arquitetura