Inoculação ortotópica de células de câncer de tireoide em tireoide murina: um procedimento para estabelecer o modelo ortotópico de camundongo com câncer de tireoide

A inoculação ortotópica facilita a entrega de células cancerígenas a um animal receptor em um órgão ou local que corresponda ao histotipo do tecido. Para começar, prepare um camundongo nu imunocomprometido anestesiado na posição supina.

Em seguida, faça uma incisão cirúrgica na região do pescoço para revelar as glândulas salivares. Desloque as glândulas salivares e disseque os músculos da cinta para expor a traqueia subjacente e a glândula tireoide.

A glândula tireoide, uma glândula endócrina, consiste em dois lobos que ficam em ambos os lados da traqueia e circundam a cartilagem cricóide. Esses dois lobos são conectados por uma fina faixa de tecido tireoidiano chamada istmo.

Agora, prepare uma suspensão de células cancerígenas da tireoide com um tampão adequado em uma seringa. Injete cuidadosamente a suspensão celular no lobo tireoidiano do camundongo.

Posteriormente, reposicione as glândulas salivares e suture a incisão. Permita que o mouse se recupere. Monitore o camundongo semanalmente para observar o crescimento de tumores ortotópicos no lobo da tireoide.

Para inoculação ortotópica de células tumorais da tireoide, suspenda uma alíquota de células Cal62 em 5 microlitros de PBS e injete subcutaneamente 100 microlitros de analgésico e 100 microlitros de antibiótico em um camundongo nu BALB/c de 7 semanas. Depois de confirmar a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé, coloque o animal sob um microscópio de dissecação e desinfete o pescoço do animal com iodopovidona.

Em seguida, faça uma incisão de aproximadamente 2 centímetros na pele e desloque as glândulas salivares para expor o pescoço. Use uma pinça de dissecção e/ou tesoura para dissecar os músculos da cinta para expor a traqueia e a glândula tireóide e use uma seringa de 10 microlitros para injetar o volume de 5 microlitros de células tumorais no lóbulo tireoidiano direito, localizado ao lado da cartilagem cricóide.

Quando todas as células tiverem sido entregues, reposicione as glândulas salivares e use suturas trançadas de seda, revestidas e não absorvíveis para fechar a incisão. Em seguida, aplique iodopovidona na área da ferida e coloque o camundongo em uma manta térmica com monitoramento até a recuperação total.